[发明专利]使用力诱导的链侵入原位形成发夹

摘要

本发明涉及一种用于核酸测序反应的基底的制备方法。更具体地，本发明提供了一种使用力诱导的链侵入制备发夹的新方法。通过该方法制备的发夹和使用这些发夹的核酸分析方法也是本发明的一部分。

主权项

1.一种制备包含感兴趣的序列的发夹的方法，所述方法包含以下步骤：a)提供核酸HP1，所述核酸包含：·与第一表面结合的第一末端；·连接至所述第一末端的序列A的单链区域，·与所述单链区域A杂交的序列A'的单链区域，其中所述单链区域A和所述单链区域A'不共价连接；·与所述序列A'的单链区域连接的至少一个序列C的单链区域；·与所述序列C的单链区域连接的第二末端，其中所述第二末端结合到第二表面；·其中第一表面和第二表面之一是可移动的表面，b)提供至少一种核酸HP2，所述核酸包含：·包含感兴趣的序列的双链区域，·与所述双链区域的第一末端连接的环，·具有序列A的单链区域，其连接至所述双链区域的第二末端的第一链，所述序列A的区域连接至序列C'的单链区域，C'与C互补；·具有序列A'的单链多核苷酸，其连接至所述双链多核苷酸分子的第二末端的第二链，其中序列A和序列A'的单链多核苷酸杂交；c)在步骤b)的所述核酸HP2存在时，通过施加至少3pN的拉力移开表面，使步骤a)的所述核酸HP1变性；和d)获得发夹。