[发明专利]用于选择具有脂肪酶活性的酶的方法在审

专利信息
申请号: 201680032769.9 申请日: 2016-04-07
公开(公告)号: CN107864658A 公开(公告)日: 2018-03-30
发明(设计)人: R·布拉扎伊;N·托列洛;C·埃姆里克;A·斯文森;J·布拉斯克;A·奥尔森;K·希拉诺;A·特维特 申请(专利权)人: 诺维信公司
主分类号: C12Q1/34 分类号: C12Q1/34;C12N15/55;C12N9/20
代理公司: 北京尚诚知识产权代理有限公司11322 代理人: 顾小曼
地址: 丹麦*** 国省代码: 暂无信息
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摘要: 在此提供的是用于增强脂肪酶活性的方法和手段。该系统利用乳剂用于将合成化合物的文库进行体外区室化,这些合成化合物具有与脂肪酶底物(例如甘油三酸酯)连接的多核苷酸。具有较大的脂肪酶活性的表达的多肽将优先从该连接的多核苷酸水解该底物。编码具有较小的脂肪酶活性的多肽的基因将保持与该底物连接,并且可以被去除以富集具有更多活性的变体的文库。还描述的是可以用于该方法中的合成化合物和乳剂。
搜索关键词: 用于 选择 具有 脂肪酶 活性 方法
【主权项】:
一种选择具有脂肪酶活性的多肽的方法,该方法包括:(i)将复数个合成化合物悬浮在水相中,其中这些合成化合物各自包括:(a)编码多肽的多核苷酸,以及(b)与所述多核苷酸连接的脂肪酶底物;并且其中该水相包括用于表达该多肽的组分;(ii)与该水相形成油包水乳剂,其中这些合成化合物在该乳剂的水性液滴中被区室化;(iii)在该乳剂的水性液滴内表达该多肽,其中在水性液滴中具有脂肪酶活性的多肽水解在该液滴中的一个或多个合成化合物;并且(iv)分离这些合成化合物以回收水解的和/或非水解的合成化合物。
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