[发明专利]确定体内相互作用模式的方法有效
| 申请号： | 201680068956.2 | 申请日： | 2016-12-08 |
| 公开（公告）号： | CN108291913B | 公开（公告）日： | 2021-08-17 |
| 发明（设计）人： | J·莫莱肯;M·莫尔霍伊;C·加斯纳;M·恩德斯费尔德;J·T·雷古拉 | 申请（专利权）人： | 豪夫迈·罗氏有限公司 |
| 主分类号： | G01N33/569 | 分类号： | G01N33/569;G01N33/53;G01N33/536 |
| 代理公司： | 北京市中咨律师事务所 11247 | 代理人： | 柴云峰;黄革生 |
| 地址： | 瑞士*** | 国省代码： | 暂无信息 |
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| 摘要： | 本文报道了用于确定与具有至少两个特异性结合抗原的结合位点的人IgG1亚类抗体与多聚体抗原的结合相互作用的方法，其包括以下步骤：1)确定抗体对多聚体抗原的结合亲和力，和2)在足以将抗体切割成Fab和Fc区的条件和时间下，温育包含抗体和衍生自牙龈红棕色单胞菌的赖氨酸‑牙龈菌蛋白酶的多肽的混合物，并确定抗体的Fabs对多聚体的结合亲和力，由此如果在两个步骤中确定的结合亲和力相当，则抗体对多聚体抗原的结合亲和力是亲和力驱动的，并且如果在两个步骤中确定的结合亲和力不同，则抗体对多聚体抗原的结合亲和力是亲合力驱动的。 | ||
| 搜索关键词： | 确定 体内 相互作用 模式 方法 | ||
【主权项】：
1.一种确定人IgG1亚类的抗体与多聚体抗原的结合相互作用的方法，包括以下步骤：1)确定抗体对多聚体抗原的结合亲和力，2)在还原剂存在下，在30℃至42℃的温度下，将包含抗体、抗原和牙龈红棕色单胞菌的赖氨酸‑牙龈菌蛋白酶或其酶活性片段的混合物在7.5至8.5的pH下温育10min至240min时间以将抗体切割成Fab和Fc区，由此抗体的浓度高于抗原的浓度，并确定抗体的Fab对于多聚体抗原的结合亲和力，和如果在两个步骤中确定的结合亲和力相当，则确定抗体对多聚体抗原的结合亲和力是亲和力驱动的，并且如果在两个步骤中确定的结合亲和力不同，则抗体对多聚体抗原的结合亲和力是是亲合力驱动的。
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