[发明专利]用于将片段化的核酸连接在一起的方法和试剂盒

摘要

提供了用于将片段化的核酸序列连接在一起的方法和试剂盒，其包括执行扩增步骤，所述扩增步骤包括使疑似包括片段化的靶核酸的样品与一对外部引物和一对自互补的内部引物接触，和产生全长靶核酸。所述方法可以包括执行扩增步骤、杂交步骤和检测步骤。此外，提供了试剂盒，其被设计成用于检测靶核酸序列。

主权项

1.一种用于将片段化的核酸连接在一起的方法，所述方法包括下述步骤：‑ 执行扩增步骤，该扩增步骤包括使疑似包含片段化的靶核酸的样品与以下物质接触：‑ 一对外部引物，其包含第一核酸序列和第二核酸序列，如果任何靶核酸存在于所述样品中，则产生包含第一有义链和第一反义链的第一扩增产物；和‑ 一对自互补的内部引物，其包含第三核酸序列和第四核酸序列，所述第三核酸序列被构造成与所述第一扩增产物的第一反义链杂交以产生第二扩增产物的第二有义链，且所述第四核酸序列被构造成与所述第一扩增产物的第一有义链杂交以产生所述第二扩增产物的第二反义链；和‑ 如下产生全长靶核酸：‑ 使所述第一有义链的第一个3’末端区域与所述第一反义链的第二个3’末端区域退火，其中所述第一有义链的第一个3’末端区域引发所述第一有义链在所述第一反义链上面的延伸，且所述第一反义链的第二个3’末端区域引发所述第一反义链在所述第一有义链上面的延伸；和‑ 使所述第二有义链的第三个3’末端区域与所述第二反义链的第四个3’末端区域退火，其中所述第二有义链的第三个3’末端区域引发所述第二有义链在所述第二反义链上面的延伸，且所述第二反义链的第四个3’末端区域引发所述第二反义链在所述第二有义链上面的延伸。