[发明专利]一种利用氯胺T标记OxLDL‑Ab的方法

摘要

本发明属于药物标记技术领域，公开了一种利用氯胺T标记OxLDL‑Ab的方法。该方法包括以下步骤(1)在反应容器中依次加入PBS缓冲液、NaI溶液、OxLDL‑Ab溶液及氯胺T，并于2～10秒内盖上瓶盖，反应1～5min；(2)在得到的反应产物中加入偏重亚硫酸钠Na2S2O5溶液以使反应终止；其中Na2S2O5溶液的浓度为2.5～6mg/ml；Na2S2O5与氯胺T的摩尔比例为1.2～2.4；(3)以PBS缓冲液淋洗PD‑10柱直至柱平衡；(4)将步骤(2)得到的反应产物过步骤(3)中得到的平衡后的PD‑10柱。该方法具有标记率高、标记时间短、稳定性好、放射化学纯度高且易于标准化规范操作的有益效果。

主权项

一种利用氯胺T标记OxLDL‑Ab的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：(1)在反应容器中依次加入PBS缓冲液、NaI溶液并混合均匀后，再利用移液管向该混匀后的溶液中加入OxLDL‑Ab溶液，加入时移液管下端要伸入至混合溶液液面内1～3mm处，加入OxLDL‑Ab溶液后再次混合均匀；然后加入氯胺T，并于2～10秒内盖上瓶盖，反应1～5min；所述PBS缓冲液为磷酸盐缓冲液；所述NaI为Na125I、Na123I或Na131I；所述氯胺T溶液的浓度为2～6mg/ml，PBS缓冲液的浓度为0.1～0.4mg/ml，pH值为7.0～7.8；OxLDL‑Ab溶液与NaI溶液的用量比为30μg/28MBq～40μg/28MBq；(2)在步骤(1)得到的反应产物中加入偏重亚硫酸钠Na2S2O5溶液以使反应终止；其中Na2S2O5溶液的浓度为2.5～6mg/ml；Na2S2O5与氯胺T的摩尔比例为1.2～2.4；(3)以PBS缓冲液为淋洗液淋洗PD‑10柱，淋洗3～5个柱体积后，加入含有牛血清白蛋白的PBS缓冲液再次淋洗PD‑10柱，然后加入PBS缓冲液淋洗至柱平衡；(4)将步骤(2)得到的反应产物过步骤(3)中得到的平衡后的PD‑10柱，该反应产物是利用移液管转移至PD‑10柱上方且移液管不能接触柱壁及柱面，待反应产物完全渗入柱面后，立即加入PBS缓冲液淋洗，并收集淋洗液，该淋洗液即为最终的纯化后的反应产物；所述PD‑10柱为交联葡聚糖凝胶过滤色谱柱，流速为6～10cm/min。