[发明专利]新鲜间充质干细胞的制备方法在审
| 申请号： | 201710014256.1 | 申请日： | 2017-01-10 |
| 公开（公告）号： | CN108285888A | 公开（公告）日： | 2018-07-17 |
| 发明（设计）人： | 刘金宏 | 申请（专利权）人： | 刘金宏 |
| 主分类号： | C12N5/0775 | 分类号： | C12N5/0775;A01N1/02 |
| 代理公司： | 上海宏京知识产权代理事务所(普通合伙) 31297 | 代理人： | 邓文武 |
| 地址： | 200433 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种新鲜间充质干细胞的制备方法，包括如下步骤：S1，从脐带沃顿胶质中分离原代细胞；S2，差速贴壁，分离提纯脐带间充质干细胞；S3，弃去培养皿中的第一培养基，换成新鲜的第一培养基；S4，加入胰酶进行贴壁生长细胞传代；S5，重复S3步骤；S6，将S5处理后的细胞加入细胞冷冻保护液，置于‑80℃温度下保存；S7，将S6冷冻后的细胞进行复苏；S8，将S7复苏后的细胞中加入第二培养基，洗脱细胞冷冻保护液，提取细胞悬液并进行培养；S9，将S8培养后的细胞进行离心，弃去上清液，加入保养液中；本发明新鲜间充质干细胞的制备方法，避免了冻存环节，制备出新鲜的间充质干细胞，使细胞活性和数量明显增多，不良反应更少，运输和使用更方便。 | ||
| 搜索关键词： | 间充质干细胞 制备 培养基 新鲜 细胞 细胞冷冻 保护液 培养皿 脐带间充质干细胞 贴壁生长细胞 传代 复苏 差速贴壁 分离提纯 细胞活性 细胞悬液 原代细胞 胶质 保养液 上清液 冻存 脐带 洗脱 胰酶 冷冻 保存 重复 环节 运输 | ||
【主权项】：
1.一种新鲜间充质干细胞的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：S1，从脐带沃顿胶质中分离原代细胞，接种于培养皿，放置于培养箱中培养；S2，差速贴壁，分离提纯脐带间充质干细胞；S3，弃去培养皿中的第一培养基，换成新鲜的第一培养基；S4，加入胰酶进行贴壁生长细胞传代；S5，弃去培养皿中的第一培养基，换成新鲜的第一培养基；S6，将S5处理后的细胞加入细胞冷冻保护液，置于‑80℃温度下保存；S7，将S6冷冻后的细胞进行复苏；S8，将S7复苏后的细胞中加入第二培养基，洗脱细胞冷冻保护液，提取细胞悬液并进行培养；S9，将S8培养后的细胞进行离心，弃去上清液，加入保养液中。
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