[发明专利]一种制备鲑鱼降钙素的方法有效
申请号: | 201710015199.9 | 申请日: | 2017-01-10 |
公开(公告)号: | CN106755085B | 公开(公告)日: | 2020-05-12 |
发明(设计)人: | 刘昱辉;谭杰;李梅;贾士荣;王志兴 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院生物技术研究所 |
主分类号: | C12N15/84 | 分类号: | C12N15/84;C12N15/62;C07K14/585 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 关畅;何叶喧 |
地址: | 100081 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明公开了一种制备鲑鱼降钙素的方法。本发明提供的方法依次包括如下步骤:(1)将含有表达盒的重组载体导入受体植物,得到转基因植物;所述表达盒自上游至下游依次包括如下元件:植物油体蛋白基因的启动子、融合基因和终止序列;所述融合基因中含有编码蛋白标签的区段丙、编码植物油体蛋白的区段甲、蛋白酶的酶切识别序列和编码鲑鱼降钙素的前体的核酸分子;(2)取转基因植物的种子,提取油体;(3)利用所述蛋白标签从所述油体中纯化所述融合蛋白;(4)用蛋白酶酶切融合蛋白;(5)分离鲑鱼降钙素;(6)醋酸化;(7)脱盐。采用本发明所提供的方法可以得到生物学活性较高的鲑鱼降钙素。因此,本发明提供的方法具有重要的应用价值。 | ||
搜索关键词: | 一种 制备 鲑鱼 降钙素 方法 | ||
【主权项】:
一种制备鲑鱼降钙素的方法,依次包括如下步骤:(1)将含有表达盒的重组载体导入受体植物,得到转基因植物;转基因植物中表达融合蛋白;所述表达盒自上游至下游依次包括如下元件:植物油体蛋白基因的启动子、融合基因和终止序列;所述融合基因中含有区段丙、区段甲、区段丁和区段乙;所述区段丙编码蛋白标签;所述区段甲编码植物油体蛋白;所述区段丁为蛋白酶的酶切识别序列;所述区段乙编码鲑鱼降钙素的前体;所述鲑鱼降钙素的前体为氨基酸序列如序列表中序列5自N末端起第158至190位所示的蛋白质;(2)取转基因植物的种子,提取油体;(3)利用所述蛋白标签从所述油体中纯化所述融合蛋白;(4)取步骤(3)得到的融合蛋白,用蛋白酶进行酶切;(5)从步骤(4)的酶切产物中分离鲑鱼降钙素;(6)醋酸化;(7)脱盐。
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