[发明专利]一种检测融合基因BCR‑ABL(P210）mRNA表达的试剂盒

摘要

本发明涉及一种检测融合基因BCR‑ABL（P210） mRNA表达的试剂盒，特别是涉及以一步法实时荧光定量逆转录‑聚合酶链反应（Real‑Time qPCR）技术快速、定量检测融合基因BCR‑ABL（P210） mRNA的试剂盒。本试剂盒具有很高的灵敏度和特异性，通过本发明的试剂盒实现对外周血或骨髓中融合基因BCR‑ABL（P210） mRNA进行定量检测，检测慢性粒细胞白血病（CML）白血病中融合基因BCR‑ABL（P210）的mRNA表达水平，以有利于诊断、评价患者疗效、预后及对微小残留病变复发的监测。

主权项

一种Real‑Time Q‑PCR检测融合基因BCR‑ABL(P210) mRNA表达的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括：（1）RNA提取试剂、BCR‑ABL(P210)反应液、ABL反应液、一步法PCR酶系、BCR‑ABL(P210)阳性定量参考品1‑5、ABL阳性定量参考品1‑4和阴性对照品，和（2）分隔并集中包装这些试剂管的包装盒；其中，所述BCR‑ABL(P210)反应液中正向和反向引物分别是：5’‑TCCACAGCATTCCGCTGAC‑3’（SEQ ID NO:1），5’‑ CACTCAGACCCTGAGGCTCAAA‑3’（SEQ ID NO:2）；所述BCR‑ABL(P210)反应液中寡核苷酸探针是：5’‑X‑GCCCTTCAGCGGCCAGTAGCATCT‑Y‑3’ （SEQ ID NO:3），其中X表示的是荧光报告基团，Y表示的是荧光淬灭基团；所述ABL反应液中正向和反向引物分别是：5’‑GACGTCTGGGCATTTGGAGTA‑3’（SEQ ID NO:4），5’‑TCATACACCTGGGACAGGTCAA‑3’（SEQ ID NO:5）所述ABL反应液中寡核苷酸探针是：5’‑X‑ ATGGCATGTCCCCTTACCCGGGA ‑Y‑3’ （SEQ ID NO:6），其中X表示的是荧光报告基团，Y表示的是荧光淬灭基团；所述BCR‑ABL(P210)阳性定量参考品1‑5均为含有BCR‑ABL(P210)目的片段的重组质粒，其浓度为1×103拷贝/5μL～1×107拷贝/5μL；所述ABL阳性定量参考品1‑4均为含有ABL目的片段的重组质粒，其浓度为1×103拷贝/5μl～1×106拷贝/5μl。