[发明专利]一种基于DNA分子标记的初烤烟叶品种纯度抽样检测方法在审
| 申请号： | 201710050670.8 | 申请日： | 2017-01-23 |
| 公开（公告）号： | CN106755490A | 公开（公告）日： | 2017-05-31 |
| 发明（设计）人： | 张轲;陈丹;张冀武;杨青;孙浩巍;龙杰;张晓伟;王怡海;张家瑞;周继月;李锦辉;杨艺敏;陈茂建;张庆刚 | 申请（专利权）人： | 云南省烟草质量监督检测站 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 北京创遇知识产权代理有限公司11577 | 代理人： | 李芙蓉,冯建基 |
| 地址： | 650106 云南*** | 国省代码： | 云南;53 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种基于DNA分子标记的初烤烟叶品种纯度抽样检测方法，其包括以下步骤步骤A针对不同烤烟品种，进行亲本的SSR引物筛选，筛选出不同品种间有差异的SSR引物；步骤B根据产烟区和待抽检烟叶的量，确定抽检批次；步骤C从每批次的样品中随机抽取100片烟叶，重复取样3次，总共取样数量为300片。本发明利用DNA分子标记的检测方法进行初烤烟叶品种鉴定，并且通过BioMek NXp(Beckman)自动化工作站与磁珠法植物DNA提取试剂盒相结合进行批量提取初烤烟叶DNA，结合PCR和电泳体系，将整个初烤烟叶的检测周期缩短到半个工作日，大大提高了检测效率。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 基于 dna 分子 标记 烟叶 品种 纯度 抽样 检测 方法 | ||
【主权项】：
一种基于DNA分子标记的初烤烟叶品种纯度抽样检测方法，其特征在于包括以下步骤：步骤A：针对不同烤烟品种，进行亲本的SSR引物筛选，筛选出不同品种间有差异的SSR引物；步骤B：根据产烟区和待抽检烟叶的量，确定抽检批次；步骤C：从每批次的样品中随机抽取100片初烤烟叶，重复取样3次，总共取样数量为300片，重复样品用于补缺检测或复检；步骤D：提取步骤C中的样品初烤烟叶的基因组DNA；步骤E：对所述样品初烤烟叶的基因组DNA进行质量评价；步骤F：利用被检测的样品初烤烟叶品种的SSR引物进行PCR检测；步骤G：对PCR扩增产物进行检测；步骤H：对检测的结果进行分析计算，确定品种纯度合格率。
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