[发明专利]一种肌肉干细胞的体外高效培养方法在审
申请号: | 201710062181.4 | 申请日: | 2017-02-01 |
公开(公告)号: | CN106854641A | 公开(公告)日: | 2017-06-16 |
发明(设计)人: | 沈露露;徐杰 | 申请(专利权)人: | 徐州细力再生医学科技有限公司 |
主分类号: | C12N5/077 | 分类号: | C12N5/077 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 221000 江苏省徐州市泉山区淮*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明一种肌肉干细胞的体外高效培养方法公开了一种包括肌肉组织消化酶、肌肉细胞培养基和细胞培养板包被溶液的通用型肌肉干细胞体外培养试剂盒,其特征在于,提供了一种可以快速获取并扩增肌肉干细胞,并保持肌肉干细胞的再生活力,培养的细胞形态学稳定,稳定表达肌肉干细胞标志物Pax7,增值活力强干细胞的体外培养方法,通过本发明技术可以得到较纯的小鼠肌肉干细胞,并表达肌肉干细胞标志物Pax7。此外,细胞还表达肌肉系转录因子Myf‑5、MyoD;细胞分化成肌管后稳定表达特征性的肌肉结构蛋白Desmin。 | ||
搜索关键词: | 一种 肌肉 干细胞 体外 高效 培养 方法 | ||
【主权项】:
一种肌肉干细胞的体外高效培养方法,其特征在于包括下列步骤:(1)将离体并剪碎的小鼠肢体骨骼肌加入组织消化液,在37°C孵育2小时, 1000rpm离心5min,去上清,得经消化解离的组织和细胞;(2)经消化的组织按体积比1:10加入血清以终止酶消化;1000rpm离心5min,去上清;(3)经消化的组织置于胶原蛋白包被的培养皿中,并加肌肉干细胞培养基,在37℃,5%C02的培养箱中培养;(4)当肌肉干细胞生长到70‑80%丰度时,收获细胞,用于细胞传代或下游应用。
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