[发明专利]一种葡糖苷酶多拷贝表达提高里氏木霉纤维素酶酶活的方法有效
| 申请号： | 201710065834.4 | 申请日： | 2017-02-06 |
| 公开（公告）号： | CN106811477B | 公开（公告）日： | 2019-11-22 |
| 发明（设计）人： | 薛栋升;曾徐浩 | 申请（专利权）人： | 湖北工业大学 |
| 主分类号： | C12N15/80 | 分类号： | C12N15/80;C12N15/66;C12N1/15;C12R1/885 |
| 代理公司： | 42222 武汉科皓知识产权代理事务所(特殊普通合伙) | 代理人： | 常海涛<国际申请>=<国际公布>=<进入 |
| 地址： | 430068 湖北*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种葡糖苷酶多拷贝表达提高里氏木霉纤维素酶酶活的方法，属于基因工程领域。本发明方法包括如下步骤：（1）构建以启动子序列‑信号肽编码序列‑葡糖苷酶编码序列‑终止子序列为基本单元的葡糖苷酶多拷贝表达盒。表达盒中各单元的信号肽编码序列均不相同。（2）在葡糖苷酶多拷贝表达盒两端加入限制性内切酶识别位点序列，通过限制性内切酶、DNA连接酶将表达盒构建到表达载体上。（3）将构建的重组表达载体转化到里氏木霉中，转化有重组载体的里氏木霉菌株纤维素酶酶活得到提高。本发明利用不同的信号肽进行组合，避免相同信号肽竞争，从而提高了里氏木霉所产纤维素酶的酶活。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 葡糖 苷酶多 拷贝 表达 提高 里氏 纤维素酶 方法 | ||
【主权项】：
1.一种葡糖苷酶多拷贝表达提高里氏木霉纤维素酶酶活的方法，其特征在于：包括如下步骤：/n(1)构建如下组成的葡糖苷酶多拷贝表达盒：启动子序列-信号肽1编码序列-葡糖苷酶编码序列-终止子序列-连接序列-启动子序列-信号肽2编码序列-葡糖苷酶编码序列-终止子序列-连接序列-启动子序列-信号肽3编码序列-葡糖苷酶编码序列-终止子序列；所述的启动子序列、信号肽1编码序列、葡糖苷酶编码序列、终止子序列、连接序列、信号肽2编码序列、信号肽3编码序列分别如SEQ ID NO.1-7所示；/n(2)在葡糖苷酶多拷贝表达盒两端加入限制性内切酶识别位点序列，通过限制性内切酶、DNA连接酶将表达盒构建到表达载体上；/n(3)将构建的重组表达载体转化到里氏木霉中，转化有重组载体的里氏木霉菌株纤维素酶酶活得到提高。/n
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