[发明专利]一种条件自杀性抗肿瘤靶向免疫细胞及其制备方法有效
| 申请号： | 201710084499.2 | 申请日： | 2017-02-16 |
| 公开（公告）号： | CN106867969B | 公开（公告）日： | 2020-01-07 |
| 发明（设计）人： | 刘小青;陈光风;史秀娟;朱良 | 申请（专利权）人： | 佰通生物技术(苏州)有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/10 | 分类号： | C12N5/10;C12N15/867;C12N15/63 |
| 代理公司： | 44268 深圳市君胜知识产权代理事务所(普通合伙) | 代理人： | 王永文;刘文求 |
| 地址： | 215104 江苏省苏州市工业*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开一种条件自杀性抗肿瘤靶向免疫细胞及其制备方法，包括步骤：A、利用DNA重组技术将细胞永生化基因插入第一克隆载体的克隆位点中并制成病毒颗粒；B、利用磁珠特异性选择人外周血中的一种免疫细胞，再利用步骤A中所制得的病毒颗粒感染，得永生化免疫细胞；C、利用DNA重组技术将自杀基因插入第二克隆载体中，然后转入所制得的永生化免疫细胞，即制得条件自杀性免疫细胞；D、利用DNA重组技术将单链抗体基因插入第三克隆载体的克隆位点中并制成病毒颗粒，再转染条件自杀性免疫细胞，得条件自杀性抗肿瘤靶向免疫细胞。解决了现有技术中肿瘤细胞靶向治疗副作用大、无法广泛临床应用、体内存活时间短、成本较高、可控性差的问题。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 条件 自杀性 肿瘤 靶向 免疫 细胞 及其 制备 方法 | ||
【主权项】：
1.一种条件自杀性抗肿瘤靶向免疫细胞的制备方法，其特征在于，包括步骤：/nA、利用DNA重组技术将细胞永生化基因SV40LT插入第一克隆载体的克隆位点，并通过病毒包装系统将第一克隆载体包装成病毒颗粒；/nB、利用磁珠富集法特异性选择人外周血中的一种免疫细胞，然后利用含胎牛血清的DMEM培养基进一步培养，得到扩大培养后的免疫细胞，再利用步骤A中所制得的病毒颗粒感染并进行传代培养，即得永生化免疫细胞；/nC、利用DNA重组技术将自杀基因TK基因插入第二克隆载体中，构建自杀基因TK基因的克隆载体，然后将所述自杀基因TK基因的克隆载体转入所制得的永生化免疫细胞，即制得条件自杀性免疫细胞；/nD、利用DNA重组技术将肿瘤抗原基因对应的CD19单链抗体基因插入第三克隆载体的克隆位点，然后利用病毒包装系统构建含有CD19单链抗体基因的病毒颗粒，并利用所述含有CD19单链抗体基因的病毒颗粒转染条件自杀性免疫细胞，即得到条件自杀性抗肿瘤靶向免疫细胞。/n
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