[发明专利]一种用于筛选shRNA的双萤光素酶报告基因载体及其构建方法和应用有效
| 申请号： | 201710086786.7 | 申请日： | 2017-02-17 |
| 公开（公告）号： | CN106929526B | 公开（公告）日： | 2020-06-16 |
| 发明（设计）人： | 杨安钢;阎博;刘欣禹;赵晶;杜晓;欧阳清;胡志嵩 | 申请（专利权）人： | 中国人民解放军第四军医大学 |
| 主分类号： | C12N15/63 | 分类号： | C12N15/63;C12N15/52;C12N15/66;C12Q1/66 |
| 代理公司： | 西安通大专利代理有限责任公司 61200 | 代理人： | 岳培华 |
| 地址： | 710032 陕西*** | 国省代码： | 陕西;61 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种用于筛选shRNA的双萤光素酶报告基因载体及其构建方法和应用，该载体由于含有FLuc片段、用于插入待抑制靶基因的第一多克隆位点、RLuc表达框以及用于插入待筛选shRNA的第二多克隆位点等基因片段，因此同时具备报告基因载体、shRNA真核表达载体和内参载体这三个功能。在进行双萤光素酶报告基因实验时，仅需要向细胞转染一个该载体，即可替代传统实验共同转染三个载体的操作，彻底解决了由于三个载体比例出现偏差所引起的萤光素酶活力比值的波动问题，能够增强双萤光素酶报告系统的信噪比，提高筛选抑制靶基因表达shRNA的准确性。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 用于 筛选 shrna 萤光 报告 基因 载体 及其 构建 方法 应用 | ||
【主权项】：
一种用于筛选shRNA的双萤光素酶报告基因载体，其特征在于：所述用于筛选shRNA的双萤光素酶报告基因载体包括CMV启动子、FLuc片段、用于插入待抑制靶基因的第一多克隆位点、SV40PolyA结构、RLuc表达框、HSV‑TK启动子、大肠杆菌启动子、SV40启动子、SV40复制起点、Kan/Neo抗性基因、用于插入待筛选shRNA的第二多克隆位点和HSV‑TK PolyA结构。
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