[发明专利]利用水凝胶微笼捕获蛋白质的方法有效
| 申请号： | 201710105787.1 | 申请日： | 2017-02-24 |
| 公开（公告）号： | CN106769336B | 公开（公告）日： | 2019-09-03 |
| 发明（设计）人： | 颜菁;杨洋 | 申请（专利权）人： | 苏州博福生物医药科技有限公司 |
| 主分类号： | G01N1/28 | 分类号： | G01N1/28;G01N1/40 |
| 代理公司： | 苏州创元专利商标事务所有限公司 32103 | 代理人： | 孙仿卫;汪青 |
| 地址： | 215634 江苏省苏州市*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种利用水凝胶微笼捕获蛋白的方法，其包括（1）使超支化聚丙三醇水溶液、双巯基聚乙二醇水溶液、带有标记的待捕获蛋白肽单体溶液在微流控芯片上混合得到混合液，然后使混合液、油相物质在微流控芯片上混合，获得微液滴，微液滴内，超支化聚丙三醇和双巯基聚乙二醇发生巯基‑烯的点击化学反应形成水凝胶，得到微凝胶；（2）对微凝胶进行培养使其中的蛋白肽单体发生折叠聚集；（3）加入脱乳化剂以破坏微凝胶的油相外层并进行清洗。本发明可仅捕获错误折叠程度高的蛋白质寡聚物和纤维，从而进行针对性研究。同时，水凝胶的形成无需借助加热或紫外照射，在此过程中不会对蛋白质结构产生影响，使检测结果更准确。 | ||
| 搜索关键词： | 利用 凝胶 捕获 蛋白质 方法 | ||
【主权项】：
1.一种利用水凝胶微笼捕获蛋白的方法，其特征在于：包括如下步骤：（1）使超支化聚丙三醇水溶液、双巯基聚乙二醇水溶液、带有标记的待捕获蛋白肽单体溶液在微流控芯片上混合得到混合液，然后使所述混合液、油相物质在所述微流控芯片上混合，获得微液滴，所述微液滴内，所述超支化聚丙三醇和双巯基聚乙二醇发生巯基‑烯的点击化学反应形成水凝胶，得到外层为油相内层为含有蛋白肽溶液的微凝胶；（2）对所述微凝胶进行培养使其中的蛋白肽单体发生折叠聚集，得到外层为油相内层含有不同折叠程度的聚合蛋白的微凝胶；（3）向经过步骤（2）的体系中加入脱乳化剂以破坏所述油相外层并进行清洗以除去所述微凝胶内小于所述微凝胶孔道的聚合蛋白或未聚合蛋白，即得捕获了蛋白的水凝胶微笼，所述捕获了蛋白的水凝胶微笼可用于后续的检测分析；所述脱乳化剂为全氟辛醇油。
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