[发明专利]cfDNA建库的接头、引物组、试剂盒和建库方法在审
| 申请号： | 201710116455.3 | 申请日： | 2017-03-01 |
| 公开（公告）号： | CN106867995A | 公开（公告）日： | 2017-06-20 |
| 发明（设计）人： | 岳磊;宋礼华;杨楠;宋社吾;饶海军;华晓君 | 申请（专利权）人： | 安徽安科生物工程（集团）股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10;C40B40/06;C40B50/06;C12N15/11;C12Q1/68 |
| 代理公司： | 合肥诚兴知识产权代理有限公司34109 | 代理人： | 汤茂盛 |
| 地址： | 230088 *** | 国省代码： | 安徽;34 |
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| 摘要： | 本发明属于分子基因学领域，具体涉及一种cfDNA建库的接头、引物组、试剂盒和建库方法；接头包括单链接头A和双链接头B；引物组包括SEQ ID NO.4‑6所示的序列；试剂盒包括所述接头和引物组；建库方法包括如下步骤(1)对cfDNA进行去磷酸化与变性，得单链cfDNA；(2)连接单链cfDNA与3′端被修饰的单链接头A，得3′端被修饰的单链连接产物；(3)单向扩增第一次连接产物，得双链cfDNA；(4)连接双链cfDNA与双链接头B，得双链连接产物；(5)除去双链连接产物中3′端被修饰的一条链；(6)文库质检；本发明首先将得到的ctDNA变性使其由双链变成单链，然后通过单链连接酶连接接头，使得几乎所有的ctDNA都能被捕获，避免了ctDNA的损耗，从而提高了检测灵敏度。 | ||
| 搜索关键词： | cfdna 接头 引物 试剂盒 方法 | ||
【主权项】：
一种用于cfDNA建库的接头，其特征在于，所述接头包括单链接头A和双链接头B；所述单链接头A的序列为SEQ ID NO.1，且3′端用生物素修饰；所述双链接头B包括接头B1和接头B2，所述接头B1和接头B2的序列分别为SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3。
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