[发明专利]一种提高大肠杆菌积累丙酮酸的方法有效
| 申请号： | 201710128712.5 | 申请日： | 2017-03-06 |
| 公开（公告）号： | CN108531518B | 公开（公告）日： | 2021-12-10 |
| 发明（设计）人： | 王钦宏;彭彦峰;史晓荣 | 申请（专利权）人： | 中国科学院天津工业生物技术研究所 |
| 主分类号： | C12P7/40 | 分类号： | C12P7/40;C12N1/21;C12R1/19 |
| 代理公司： | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人： | 张如佳 |
| 地址： | 300308 天津市*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | 本发明属于微生物基因工程技术领域，具体地，本发明涉及一种提高丙酮酸积累的大肠杆菌基因工程菌构建方法和生产应用。本发明所提供的基因工程菌是按照包括以下步骤的方法构建的：在野生型出发大肠杆菌中删减乳酸脱氢酶的编码基因，丙酮酸氧化酶的编码基因，磷酸转乙酰酶的编码基因和乙酸激酶的编码基因，构建得到积累丙酮酸的大肠杆菌基因工程菌KLPP。以KLPP出发，通过Tn5转座子建立突变库和高通量筛选获得丙酮酸积累提高的突变菌株，通过全基因组重测序发现提高丙酮酸积累的基因。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 提高 大肠杆菌 积累 丙酮酸 方法 | ||
【主权项】：
1.一种强化丙酮酸积累的方法，其特征在于，通过定向基因编辑删减大肠杆菌宿主细胞中乳酸脱氢酶的编码基因，丙酮酸氧化酶的编码基因，磷酸转乙酰酶的编码基因和乙酸激酶编码基因得到积累丙酮酸的大肠杆菌基因工程菌株，命名为大肠杆菌KLPP；以大肠杆菌KLPP为出发菌株，使用Tn5转座子建立菌株突变库，然后通过高通量筛选获得丙酮酸积累提高的菌株，进一步通过全基因组重测序发现新的提高丙酮酸积累的基因。
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