[发明专利]快速观察拟南芥胚珠形态及统计外珠被细胞数目的方法

摘要

本发明提供一种快速观察拟南芥胚珠形态及统计外株被细胞数目的方法，其利用荧光漂白剂处理拟南芥的胚珠，在共聚焦显微镜和普通光学显微镜下可以快速及时、快速地对拟南芥胚珠珠被细胞的数目进行统计。相比普通的切片及干涉差‑透明的方法要简便，而且效果更好。

主权项

1.一种快速观察拟南芥胚珠形态及统计外珠被细胞数目的方法，其特征在于，其具体步骤如下：（1）溶液的配制：配制1‰w/v荧光增白剂溶液和浓度为2M的氢氧化钾的溶液；（2）材料的获得：取刚要露白的拟南芥花苞放置在贴有双面胶的载玻片上，用注射器的针头挑取拟南芥的胚珠；（3）玻片制备：吸取1‰w/v荧光增白剂10µL置于载玻片上，将步骤（2）所得胚珠连同胎座置于荧光增白剂液滴上，再加入2M的氢氧化钾溶液10µL，用移液枪轻轻混匀，盖上盖玻片；（4）孵育：将步骤（3）制备好的玻片在室温中放置10‑15分钟，让荧光增白剂充分渗透进入拟南芥的胚珠中；（5）Confocal显微镜拍照：将步骤（4）所得孵育好的玻片放置在Confocal显微镜下，用波长范围在100～400nm之间的紫外线观察，并拍照；（6）外珠被细胞数目统计：统计步骤（5）所得照片中的外珠被细胞数目。