[发明专利]高危人乳头瘤病毒试剂盒及检测方法

摘要

本发明提供了一种高危人乳头瘤病毒检测试剂盒，包括HPV扩增引物，在多重PCR体系中引入了通用的荧光标记引物，设计三种荧光标记引物，就能够扩增出十几种不同长度或不同荧光的扩增子，特异性扩增引物的5’端引入20bp的特异性接头，并且在PCR体系中引入荧光标记的通用引物，通过多重PCR扩增，得到荧光标记的扩增子长度比目的扩增区域多两个接头的长度，然后多重PCR产物应用于毛细管电泳分析，得到基因型；本发明进一步降低荧光标记多重PCR的费用，并且解决HPV亚型的增多与检测成本线性增加的问题，本方法以检测14种高危HPV亚型为例，可以使多重PCR成本降低50％，并且随着检测HPV亚型的种类增多，成本降低幅度更大。

主权项

高危人乳头瘤病毒检测试剂盒，其特征在于，包括HPV扩增引物，所述HPV扩增引物为HPV16上游引物及HPV16下游引物、HPV18上游引物及HPV18下游引物、HPV31上游引物及HPV31下游引物、HPV33上游引物及HPV33下游引物、HPV35上游引物及HPV35下游引物、HPV39上游引物及HPV39下游引物、HPV45上游引物及HPV45下游引物、HPV51上游引物及HPV51下游引物、HPV52上游引物及HPV52下游引物、HPV56上游引物及HPV56下游引物、HPV58上游引物及HPV58下游引物、HPV59上游引物及HPV59下游引物、HPV66上游引物及HPV66下游引物和HPV68上游引物及HPV68下游引物，所述HPV16上游引物如序列表中SEQ ID NO.1所示；所述HPV16下游引物如序列表中SEQ ID NO.2所示；所述HPV18上游引物如序列表中SEQ ID NO.3所示；所述HPV18下游引物如序列表中SEQ ID NO.4所示；所述HPV31上游引物如序列表中SEQ ID NO.5所示；所述HPV31下游引物如序列表中SEQ ID NO.6所示；所述HPV33上游引物如序列表中SEQ ID NO.7所示；所述HPV33下游引物如序列表中SEQ ID NO.8所示；所述HPV35上游引物如序列表中SEQ ID NO.9所示；所述HPV35下游引物如序列表中SEQ ID NO.10所示；所述HPV39上游引物如序列表中SEQ ID NO.11所示；所述HPV39下游引物如序列表中SEQ ID NO.12所示；所述HPV45上游引物如序列表中SEQ ID NO.13所示；所述HPV45下游引物如序列表中SEQ ID NO.14所示；所述HPV51上游引物如序列表中SEQ ID NO.15所示；所述HPV51下游引物如序列表中SEQ ID NO.16所示；所述HPV52上游引物如序列表中SEQ ID NO.17所示；所述HPV52下游引物如序列表中SEQ ID NO.18所示；所述HPV56上游引物如序列表中SEQ ID NO.19所示；所述HPV56下游引物如序列表中SEQ ID NO.20所示；所述HPV58上游引物如序列表中SEQ ID NO.21所示；所述HPV58下游引物如序列表中SEQ ID NO.22所示；所述HPV59上游引物如序列表中SEQ ID NO.23所示；所述HPV59下游引物如序列表中SEQ ID NO.24所示；所述HPV66上游引物如序列表中SEQ ID NO.25所示；所述HPV66下游引物如序列表中SEQ ID NO.26所示；所述HPV68上游引物如序列表中SEQ ID NO.27所示；所述HPV68下游引物如序列表中SEQ ID NO.28所示；所述HPV扩增引物的5’端为20bp的特异性接头，所述高危人乳头瘤病毒检测试剂盒还包括带有荧光基团的特异性接头引物。