[发明专利]一种产高活力单宁酶菌株的制备方法在审
申请号: | 201710163227.1 | 申请日: | 2017-03-19 |
公开(公告)号: | CN106834142A | 公开(公告)日: | 2017-06-13 |
发明(设计)人: | 曹庸;张帅;朱华伟;林健辉;农嘉仪 | 申请(专利权)人: | 曹庸 |
主分类号: | C12N1/14 | 分类号: | C12N1/14;C12R1/685 |
代理公司: | 张家界市慧诚商标专利事务所43209 | 代理人: | 高红旺 |
地址: | 510000 广东省广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 一种产高活力单宁酶菌株的制备方法,包括(1)取2 g角倍,用5 mL dd水冲洗,收集冲洗液至50 mL三角瓶中,用dd水定容并摇匀,得到10‑1的菌溶液,梯度稀释至10‑10,各梯度菌溶液于筛选培养基上涂平板2个,28℃恒温培养60 h,挑取平板上菌落及水解圈较大的单菌落,分别接于PDA斜面活化84 h;(2)将活化后的PDA斜面上的孢子,用dd水配成2×106个/mL的孢子液,然后接种l mL于50 mL固态发酵培养基中,28℃恒温培养84 h,然后进行单宁酶提取及酶活力测定,通过比较酶活力确定产单宁酶活力最高的菌株。本发明采用固态发酵技术生产单宁酶,所产单宁酶比活力高达8658.37 U/mg,比美国Sigma公司所产单宁酶的比活力(3185.25 U/mg)高5473.12 U/mg,而且工艺简单,节约时间。 | ||
搜索关键词: | 一种 活力 单宁 菌株 制备 方法 | ||
【主权项】:
一种产高活力单宁酶菌株的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)取2 g角倍,用5 mL dd水冲洗,收集冲洗液至50 mL三角瓶中,用dd水定容并摇匀,得到10‑1的菌溶液,梯度稀释至10‑10,各梯度菌溶液于筛选培养基上涂平板2个,28 ℃恒温培养60 h,挑取平板上菌落及水解圈较大的单菌落,分别接于PDA斜面活化84 h;(2) 将活化后的PDA斜面上的孢子,用dd水配成2×106 个/mL的孢子液,然后接种l mL于50 mL固态发酵培养基中,28 ℃恒温培养84 h,然后进行单宁酶提取及酶活力测定,通过比较酶活力确定产单宁酶活力最高的菌株。
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