[发明专利]固定化酶应用于澄清型南瓜-山楂复合汁的加工法

摘要

本发明公开了一种固定化果胶酶‑糖化酶的制备方法，将用凝胶法制备得到的海藻酸钠/氧化石墨烯凝胶小球，用N,N’‑二环已基碳二亚胺(DCC)/N‑羟基琥珀酰亚胺(NHS)活化，得到羧基活化的活性小球，然后果胶酶和糖化酶混合酶通过酰胺键偶联于小球上，得到高活力的固定化果胶酶‑糖化酶。本发明还同时公开了利用上述方法制备而得的固定化果胶酶‑糖化酶进行的澄清型南瓜‑山楂复合汁的加工方法：经过原料(南瓜、山楂)的挑选、清洗、热烫、打浆、固定化果胶酶‑糖化酶酶解处理、过滤、离心、杀菌、无菌包装工序；制得澄清型南瓜‑山楂复合汁。

主权项

固定化果胶酶‑糖化酶的制备方法，其特征是：以海藻酸钠/氧化石墨烯为载体，包括如下步骤：A)、海藻酸钠/氧化石墨烯小球的活化：将海藻酸钠/氧化石墨烯凝胶小球加入到容器中，然后加入N,N’‑二环己基碳二亚胺、N‑羟基琥珀酰亚胺以及加入N,N’‑二甲基甲酰胺、三乙胺，混合均匀后，室温下磁力搅拌，过滤，洗涤产物，得到活化后的海藻酸钠/氧化石墨烯复合凝胶小球；N,N’‑二环己基碳二亚胺：海藻酸钠＝1:1.12～1.21的摩尔比，N‑羟基琥珀酰亚胺：海藻酸钠＝1:1.12～1.21的摩尔比；B)、果胶酶和糖化酶混合酶液配制：将果胶酶用缓冲液配制成酶活为250～350U/ml的果胶酶液，用缓冲液稀释糖化酶，得酶活为900～1100U/ml的糖化酶液；按照果胶酶：糖化酶＝5.8～6.2:5的酶活力，将果胶酶液和糖化酶液混合，得混合酶液；C)、果胶酶‑糖化酶的固定化：取1g步骤A)所得的活化后的海藻酸钠/氧化石墨烯小球加入13～17mL步骤B)所得的混合酶液，25～55℃水浴震荡反应15～50min，用去离子水冲洗，过滤，得固定化果胶酶‑糖化酶。