[发明专利]视黄醇结合蛋白的大肠杆菌表达体系及其蛋白的制备方法有效
| 申请号： | 201710172528.0 | 申请日： | 2017-03-22 |
| 公开（公告）号： | CN106906235B | 公开（公告）日： | 2020-07-10 |
| 发明（设计）人： | 刘鹏飞;赵占勇;郑长龙 | 申请（专利权）人： | 北京达成生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/70 | 分类号： | C12N15/70;C12N1/21;C12P21/02;C07K14/47;C07K1/22;G01N33/68;C12R1/19 |
| 代理公司： | 北京力量专利代理事务所(特殊普通合伙) 11504 | 代理人： | 宋林清 |
| 地址： | 100096 北京市昌*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明涉及微生物分子生物学领域，特别涉及视黄醇结合蛋白的大肠杆菌表达体系及其蛋白的制备方法。一种视黄醇结合蛋白基因工程菌的大肠杆菌表达体系包括以下步骤：人工合成链接有FAD合成酶的视黄醇结合蛋白基因，通过PCR反应程序得到扩增基因产物；PCR扩增的引物为RBPF：ATCGCCATGGATGCTGCATCAGCCGACC和RBPR：ATCGCTCGAGTTACTGCACTTTTTTAAACACC；将所述扩增基因产物用NcoI和XhoI双酶切，并串联构建到NcoI和XhoI双酶切后的pET30a载体上，构建成为视黄醇结合蛋白表达载体；将所述视黄醇结合蛋白表达载体转化至大肠杆菌细胞中获得视黄醇结合蛋白基因工程菌的大肠杆菌表达体系。本发明的有益效果在于：能够解决现有技术中所面临的产量少，纯度低，复性率低等问题，经济有效的解决现有技术中存在的问题。 | ||
| 搜索关键词： | 视黄醇 结合 蛋白 大肠杆菌 表达 体系 及其 制备 方法 | ||
【主权项】：
一种视黄醇结合蛋白的大肠杆菌表达体系，其特征在于，包括以下步骤：人工合成链接有FAD合成酶的视黄醇结合蛋白基因，通过PCR反应程序得到扩增基因产物；PCR扩增的引物为RBPF：ATCGCCATGGATGCTGCATCAGCCGACC和RBPR：ATCGCTCGAGTTACTGCACTTTTTTAAACACC；将所述扩增基因产物用NcoI和XhoI双酶切，并串联构建到NcoI和XhoI双酶切后的pET30a载体上，构建成为视黄醇结合蛋白表达载体；将所述视黄醇结合蛋白表达载体转化至大肠杆菌细胞中获得视黄醇结合蛋白基因工程菌的大肠杆菌表达体系。
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