[发明专利]一种基因敲除减毒单核细胞增生李斯特氏菌及其制备方法在审
| 申请号： | 201710179593.6 | 申请日： | 2017-03-23 |
| 公开（公告）号： | CN107058202A | 公开（公告）日： | 2017-08-18 |
| 发明（设计）人： | 谢曼曼;刘箐;孙静娟;马俊飞;马兰 | 申请（专利权）人： | 上海理工大学 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12N15/74;C12N15/66;A61K39/02;A61P31/04;C12R1/01 |
| 代理公司： | 上海精晟知识产权代理有限公司31253 | 代理人： | 冯子玲 |
| 地址： | 200093 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 一种基因敲除减毒单核细胞增生李斯特氏菌，缺失hly基因，其保藏编号为CCTCC M 2016523。还提供了上述减毒单核细胞增生李斯特氏菌的制备方法，以EGD‑e基因组为模板扩增hly基因的上游片段P1/P2、下游片段P3/P4；然后进行单酶切，产物使用连接酶连接，得到的上下游连接产物与pMD19‑T Vector连接；将连有同源臂的pMD19‑T Vector与pKSV7质粒使用限制性内切酶SmaI和SalI进行双酶切，产物使用连接酶连接，将阳性克隆的质粒抽提后进行SmaI和SalI限制性内切酶双酶切，获得hly基因缺失的Lm减毒菌株。通过实验证明，hly基因敲除后，Lm的毒性下降。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 基因 单核 细胞 增生 李斯特 及其 制备 方法 | ||
【主权项】：
一种基因敲除减毒单核细胞增生李斯特氏菌，其特征在于：所述的这种基因敲除减毒单核细胞增生李斯特氏菌缺失hly基因。
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