[发明专利]稳定表达抗TNF-α单克隆抗体细胞表达体系有效
| 申请号： | 201710187701.4 | 申请日： | 2017-03-27 |
| 公开（公告）号： | CN107236710B | 公开（公告）日： | 2021-03-26 |
| 发明（设计）人： | 罗学刚;张同存;苗峙;李潜;王鹏;赵涧 | 申请（专利权）人： | 天津科技大学 |
| 主分类号： | C12N5/10 | 分类号： | C12N5/10;C12N15/90;C12N15/85 |
| 代理公司： | 天津盛理知识产权代理有限公司 12209 | 代理人： | 赵瑶瑶 |
| 地址： | 300222 天津市河*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种稳定表达抗TNF‑α单克隆抗体的细胞表达体系及构建方法和应用，依照细胞密码子偏爱性将抗TNF‑α单克隆抗体的轻、重链编码基因进行优化，构建了以Bak1基因等做为靶标的抗TNFα人鼠嵌合单克隆抗体同源重组载体，同时针对Bak1等靶标基因外显子区域构建具有特异性切割作用的CRISPR/Case9载体，釆用脂质体转染的方式将两种载体共同导入中华仓鼠卵巢细胞(CHO)细胞，筛选获得稳定表达抗TNF‑α单克隆抗体的阳性细胞株。本发明可用于抗TNF‑α单克隆抗体的高效生产，该抗体可用于类风湿性关节炎、强直性脊柱炎等疾病的治疗。 | ||
| 搜索关键词： | 稳定 表达 tnf 单克隆抗体 细胞 体系 | ||
【主权项】：
一种稳定表达抗TNF‑α单克隆抗体细胞株，其特征在于：依照细胞密码子偏爱性优化的轻链、重链编码基因进行密码子，构建轻链、重链共表达的真核表达质粒，利用CRISPR‑Cas9技术实现抗体基因在宿主基因组的稳定定点整合，获得稳定表达抗TNF‑α单克隆抗体的阳性细胞株。
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