[发明专利]一种人血浆蛋白α1-抗胰蛋白酶的分离纯化方法有效
| 申请号： | 201710193181.8 | 申请日： | 2017-03-28 |
| 公开（公告）号： | CN107163138B | 公开（公告）日： | 2021-02-09 |
| 发明（设计）人： | 何洁;郭采平;丁玉江;谭淑娴;王锦才;张战;张运佳;黄伟荣 | 申请（专利权）人： | 深圳市卫光生物制品股份有限公司 |
| 主分类号： | C07K14/81 | 分类号： | C07K14/81;C07K1/18 |
| 代理公司： | 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 | 代理人： | 单香杰 |
| 地址： | 518107 广东*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种人血浆蛋白α1‑抗胰蛋白酶的分离纯化方法，包括如下步骤：(1)将低温乙醇‑Cohn法分离血浆蛋白工艺产生的FIV‑1蛋白沉淀溶解于缓冲液中，待蛋白充分溶解完，过滤，取滤液备用；(2)滤液经过阴离子交换层析，收集含AAT的洗脱液，所述阴离子交换层析的填料为DEAE Sepharose High Performance；(3)含AAT的洗脱液进行干热灭活和S/D灭活，得到灭活后的含AAT洗脱液；(4)灭活后的含AAT洗脱液经过阳离子交换层析，得到高纯度高活性的AAT穿透液，所述阳离子交换层析的填料为Macro‑Prep High S；(5)AAT穿透液经过超滤浓缩、除菌过滤和分装冻干，即可得到AAT制剂。本发明制备出的α1‑抗胰蛋白酶具有高纯度、高活性、高回收率、步骤简单、重复性好以及易规模化生产的特点，解决了目前其生产工艺中存在的问题。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 血浆 蛋白 胰蛋白酶 分离 纯化 方法 | ||
【主权项】：
一种人血浆蛋白α1‑抗胰蛋白酶的分离纯化方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)将低温乙醇‑Cohn法分离血浆蛋白工艺产生的FIV‑1蛋白沉淀溶解于缓冲液中，待蛋白充分溶解完，过滤，取滤液备用；(2)滤液经过阴离子交换层析，收集含AAT的洗脱液，所述阴离子交换层析的填料为DEAE Sepharose High Performance；(3)含AAT的洗脱液进行干热灭活和S/D灭活，得到灭活后的含AAT洗脱液；(4)灭活后的含AAT洗脱液经过阳离子交换层析，得到高纯度高活性的AAT穿透液，所述阳离子交换层析的填料为 Macro‑Prep High S；(5)AAT穿透液经过超滤浓缩、除菌过滤和分装冻干，即可得到AAT制剂。
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