[发明专利]禾谷镰孢的特异性PCR扩增引物及检测体系与应用

摘要

本发明提供禾谷镰孢的特异性PCR扩增引物及检测体系，所述引物包括Fg18TF和Fg18TR(Seq ID No1和2)以及一对巢式外引物HW18TF/HW18TR(Seq ID No3和4)。本发明基于禾谷镰孢与其他镰孢种在β‑tubulin基因序列上的差异，设计出一系列检测禾谷镰孢的引物，从中筛选出特异性最强的引物Fg18TF/Fg18TR，并通过设计一对巢式外引物HW18TF/HW18TR来提高其检测灵敏度，在此基础上建立PCR检测体系，可从发病植物组织及土壤中复杂的病原菌环境快速、准确地检测出禾谷镰孢。根据该方法构建的检测试剂盒操作简便，特异性好，灵敏度高，可对禾谷镰孢的各种形态的繁殖体如菌丝、分生孢子等进行检测，对禾谷镰孢疫情的早期预警、疫区的病原监测等方面具有重要意义。

主权项

禾谷镰孢(Fusarium graminearum)的特异性PCR扩增引物，其特征在于，包括：正向引物Fg18TF：5’‑TTGTAAGTGTTTTCCTCTGACCT‑3’反向引物Fg18TR：5’‑AGAAAGCAGCACCGATTTGG‑3’；以及正向巢式外引物HW18TF：5’‑AACATGCGTGAGATTGTAAGTG TT‑3’反向巢式外引物HW18TR：5’‑TAAACACCATTGCTGTCGAGA‑3’。