[发明专利]一种肿瘤干细胞靶向脂质纳米粒及制备方法与应用

摘要

本发明提供一种肿瘤干细胞靶向脂质纳米粒，由A15‑聚乙二醇‑十八醇嫁接物、单硬脂酸甘油酯、盐霉素组成，亲水的含端氨基端羧基的聚乙二醇通过酯化反应链接十八醇，十八醇的长脂肪链段可插入脂质纳米粒，其中A15为RNA适配体，与CD133分子亲和力强，可靶向CD133高表达的肝癌肿瘤干细胞。该脂质纳米粒作为载体包封肿瘤干细胞特异性药物盐霉素，通过A15的靶向作用，递送至肿瘤干细胞并发挥抗肿瘤药效，靶向并治疗CD133分子高表达的肝癌肿瘤干细胞。

主权项

1.一种肿瘤干细胞靶向脂质纳米粒，其特征在于，由A15‑聚乙二醇‑十八醇嫁接物、单硬脂酸甘油酯、单硬脂酸聚乙二醇酯和盐霉素组成，其中A15‑聚乙二醇‑十八醇嫁接物的重量百分比为9.1~17.9wt%、单硬脂酸甘油酯的重量百分比为69.5~72.0 wt%，单硬脂酸聚乙二醇酯的重量百分比为3.6~7.6 wt%，盐霉素的重量百分比为3.6~7.6 wt%；所述肿瘤干细胞靶向脂质纳米粒通过以下步骤实现：（1）分别取含有端氨基及端羧基的聚乙二醇、同摩尔量的十八醇，溶于无水二氯甲烷，按照摩尔比十八醇：二环己基碳二亚胺：N‑羟基琥珀酰亚胺1:1:1~1.5的比例加入二环己基碳二亚胺及N‑羟基琥珀酰亚胺，室温反应后，将反应液滴加至8~10倍体积的冷无水乙醚，4℃过夜，使产物析出，离心收集沉淀，烘干得游离端氨基聚乙二醇‑十八醇嫁接物；（2）分别取20mg单硬脂酸甘油酯、1.0~2.0mg单硬脂酸聚乙二醇酯及1.0~2.0mg端氨基聚乙二醇‑十八醇嫁接物、1.0~2.0mg盐霉素置于2.0mL无水乙醇，水浴50℃加热溶解，为有机相，超纯水为分散相，磁力搅拌条件下，有机相注入分散相，继续搅拌5min，得含游离氨基的脂质纳米粒；（3）取游离氨基的脂质纳米粒，加入氨基摩尔数1~2倍的N, N‑二琥珀酰亚胺基碳酸酯，室温反应9h，加入等氨基摩尔数的端氨基适配体A15，反应过夜，反应结束后，将反应液置于分子量为30 kDa的超滤离心管，高速离心，弃滤液，加焦碳酸二乙酯处理水清洗两次，除去未反应的A15，未滤过液体即为肝癌肿瘤干细胞靶向脂质纳米粒分散液。