[发明专利]嗜水气单胞菌表面特异性抗原AhsA及其抗体和应用

摘要

本发明属于蛋白质分离纯化技术领域，具体涉及嗜水气单胞菌表面特异性抗原AhsA及其抗体和应用。嗜水气单胞菌表面特异性抗原AhsA，由基因片段在大肠杆菌细胞中表达，制备时，将所述的基因片段的编码区克隆进pET‑28a载体，转化大肠杆菌BL21感受态细菌；待细菌生长至对数生长期，以0.5mM IPTG诱导表达AhsA蛋白，25℃诱导24小时后离心收集菌体并纯化浓缩得到抗原蛋白，并基于此蛋白制备了多克隆抗体，经间接Elisa效价检测后抗体为阳性。本发明解决了嗜水气单胞菌表面特异性抗原AhsA蛋白异源表达含量低，浓度差等问题，制备得到高纯度，高浓度嗜水气单胞菌表面特异性抗原AhsA。制备的抗体可以特异性识别嗜水气单胞菌，从而为临床上该致病菌的诊断提供了新的技术手段。

主权项

嗜水气单胞菌表面特异性抗原AhsA，其特征在于，由基因片段在大肠杆菌细胞中表达，并经过纯化浓缩得到；所述基因片段序列如下：TCAGCTGCCGCTCTGGGGGTCGTCGATCACCAGCTTGCCATCCTTGACCGGGATGGTGGCGCCGGGGGCCTTGTTCATGCGGATCACCCCTTCCTGACCGGCGAGGCGGTAGGTGACGTCATAGCCAAGGGTGCGGGTGCTGCTCTCTTGCACCGTCTTGCAGCGCTGTTCGGTGGTGGTGTAGGTATCACCGGCCTGCATGTTGCCCTGCACCTGGTTGCCGGCATAGCCACCCGCCACGGCGCCTGCGGCGGTCGCCACCTTCTTGCCGTTGCCGCCACCAAACTGGTTGCCGAGCACCCCGCCCAGCGCCGCACCGACCACGGTACCCAGGATCTTGTGCTCGTCCTGCACCGGTTTGCGGTGGGTCACGCTGACGTTGCGACACTCCTGACGGGGGGTCTTGATGGTCTCGGTCACCGCTTTGCTGGCCAGCACTTCGGCGAACTGAGGCTGTGATGAAAACAGGGATCCGCTGGCGGCGGCTGACAAGGCCAGCGCAGAGGCCACACCGATCCCGACTCCTGCCAACATGGATTTGTTCAT。