[发明专利]产β-丙氨酸的重组菌及其构建方法与应用

摘要

本发明公开了产β‑丙氨酸的重组菌及其构建方法与应用。本发明所公开的重组菌的构建方法，包括：敲除受体菌的fadR基因、fabF基因、fabH基因、iclR基因、sucA基因和向受体菌中导入aspC基因或基因簇、panD基因、alkL基因和gdh基因以及增强受体菌中fadL基因、fadD基因、sthA基因、atoSC基因簇和aceBA基因簇的表达；受体菌为含有fadR基因、fabF基因、fabH基因、iclR基因和sucA基因的细菌或真菌。实验证明，利用本发明的重组菌以脂肪酸为原料生产β‑丙氨酸的转化率为60.87％，表明，可以利用本发明的重组菌制备β‑丙氨酸。

主权项

1.重组菌的构建方法，包括对受体菌进行甲或乙的改造，得到所述重组菌；所述甲为A1和A8；所述乙为A1和A8以及A2‑A7这六种中的全部或部分；A1、敲除所述受体菌的脂肪酸降解转录因子fadR基因或抑制除所述fadR基因的表达或抑制所述fadR基因编码的蛋白质的活性；A2、敲除所述受体菌的β‑酮脂酰‑ACP合酶II基因fabF基因或抑制除所述fabF基因的表达或抑制所述fabF基因编码的蛋白质的活性；A3、敲除所述受体菌的β‑酮脂酰‑ACP合酶III基因fabH基因或抑制除所述fabH基因的表达或抑制所述fabH基因编码的蛋白质的活性；A4、敲除所述受体菌的iclR基因或抑制除所述iclR基因的表达或抑制所述iclR基因编码的蛋白质的活性；A5、敲除所述受体菌的sucA基因或抑制除所述sucA基因的表达或抑制所述sucA基因编码的蛋白质的活性；A6、增加所述受体菌中外源烷烃摄入外膜蛋白基因alkL基因编码蛋白质的含量或增强所述alkL基因编码蛋白质的活性；A7、增加所述受体菌中L‑天冬氨酸合成途径中基因编码蛋白质的含量或增强所述L‑天冬氨酸合成途径中基因编码蛋白质的的活性；A8、增加所述受体菌中L‑天冬氨酸‑α‑脱羧酶panD基因编码蛋白质的含量或增强所述panD基因编码蛋白质的活性；所述受体菌为含有所述fadR基因、所述fabF基因、所述fabH基因、所述iclR基因和所述sucA基因的细菌或真菌。