[发明专利]一种检测特鲁曲班光学异构体含量的方法

摘要

本发明提供一种检测特鲁曲班光学异构体含量的方法，具体步骤包括：1)样品的准备；2)确定手性色谱分离条件；3)确定质谱条件；4)光学异构体含量测定。本发明基于手性高效液相色谱‑质谱/质谱联用技术，具有操作简单，定量准确、批量成本低，特别适用于临床药物检测/监测的需要，为体内/外特鲁曲班光学异构体的检测提供了一条新的思路和方法。

主权项

1.一种检测特鲁曲班光学异构体含量的方法，其特征在于：包括以下步骤：1)样品的准备：将生物样品与乙腈混合以沉淀蛋白，通过离心分离沉淀，将离心所得上清液吹干，得到待分析样品；或将非生物样品用乙腈溶解、定容后得到待分析样品；2)确定手性色谱分离条件：采用反相涂敷型或键合型手性色谱柱，手性填料包括多糖衍生物类填料；根据(R)‑特鲁曲班和(S)‑特鲁曲班的分离度≥1.5的要求，手性高效液相色谱分离中采用的流动相为甲醇或乙腈与水、易挥发性缓冲盐以及易挥发性酸的混合溶液，混合溶液中所述缓冲盐的浓度为0.1‑10mM，所述酸的体积分数为0.01‑0.5％，甲醇或乙腈与水的体积比为1.5‑4:1；柱温为5‑50℃；进样量为1‑10μL；流动相流速为0.1‑1mL/min，等度洗脱；3)确定质谱/质谱工作条件：采用三重四级杆质谱以及多反应监测扫描模式；母离子和子离子分别为408.1和223.1；锥孔电压为30‑50V；碰撞能量为35‑50eV；4)光学异构体含量测定：对待分析样品进行手性高效液相色谱‑质谱/质谱分析，然后利用外标法计算样品中的(R)‑特鲁曲班和(S)‑特鲁曲班的含量。