[发明专利]一种千年健指纹图谱的构建方法及其标准指纹图谱

摘要

本发明公开了一种千年健指纹图谱的构建方法及其标准指纹图谱。该构建方法包括以下步骤：S1：精密称取千年健粉末，加入甲醇后超声提取，静置冷却，用甲醇补足失重，离心，取上清液蒸发干燥，残渣加甲醇复溶，涡旋，过滤，取续滤液，即为供试品溶液；S2、吸取供试品溶液注入液相色谱仪，以高效液相色谱法采用梯度洗脱进行测定，得到千年健的指纹图谱。其中，高效液相色谱的色谱条件为：色谱柱的填料为十八烷基硅烷键合硅胶；流动相A为乙腈，流动相B为磷酸水溶液，流动相中A与B的体积比随时间逐渐增加；检测波长为285～305nm。本发明具有方法简便、稳定、精密度高、重现性好的特点，能够用于千年健药材的综合质量控制。

主权项

1.一种千年健指纹图谱的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、 供试品溶液的制备：精密称取千年健粉末，加入甲醇后超声提取，静置冷却，用甲醇补足失重，离心，取上清液蒸发干燥，残渣加甲醇复溶，涡旋，过滤，取续滤液，所得溶液即为供试品溶液；S2、 供试品溶液的测定：吸取供试品溶液注入液相色谱仪，以高效液相色谱法采用梯度洗脱进行测定，得到千年健的指纹图谱；其中，高效液相色谱的色谱条件为：色谱柱的填料为十八烷基硅烷键合硅胶；流动相 A 为乙腈，流动相 B 为磷酸水溶液，流动相中 A 与 B 的体积比随时间逐渐增加；检测波长为 285～305nm；梯度洗脱的程序是：0～10 分钟时，流动相 A∶流动相 B＝2.5:97.5；10～20 分钟时，流动相 A∶流动相 B＝2.5：97.5～3：97；20～35 分钟时，流动相 A∶流动相 B＝3：97～5：95；35～40 分钟时，流动相 A∶流动相 B＝5：95～8：92；40～50 分钟时，流动相 A∶流动相 B＝8：92～10∶90；50～60 分钟时，流动相 A∶流动相 B=10∶90～14：86；60～80 分钟时，流动相 A∶流动相 B=14：86～15：85；80～90 分钟时，流动相 A∶流动相 B=15：85～20：80；90～110 分钟时，流动相 A∶流动相 B=20：80～30：70；梯度洗脱过程中，流速为 0.5～1.0 毫升/分钟，梯度洗脱程序中的比例均为体积比。