[发明专利]基于ALV‑Jgp85基因保守区域为靶序列的siRNA重组干扰载体及其制备方法在审
| 申请号： | 201710350007.X | 申请日： | 2017-05-17 |
| 公开（公告）号： | CN107058388A | 公开（公告）日： | 2017-08-18 |
| 发明（设计）人： | 王培坤;林璐璐;秦丽莉;杨永立;李海娟;磨美兰;韦天超;黄腾;韦平 | 申请（专利权）人： | 广西大学 |
| 主分类号： | C12N15/861 | 分类号： | C12N15/861;A61K48/00;A61K31/7088;A61P31/14 |
| 代理公司： | 广西南宁公平知识产权代理有限公司45104 | 代理人： | 杨立华 |
| 地址： | 530004 广西壮族*** | 国省代码： | 广西;45 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种基于ALV‑J gp85基因保守区域为靶序列的siRNA重组干扰载体，并建立了相应制备方法，利用gp85基因设计合成siRNA，构建形成siRNA的发卡结构，进一步获得退火双链DNA后，将其克隆入腺病毒载体pHBAd‑U6‑RFP构建重组腺病毒载体pAd‑gp85‑shRNA2，测序鉴定构建成功后，在HEK 293细胞中与骨架质粒进行同源重组获得重组腺病毒。实验表明，本发明可有效地抑制GX13HG03病毒在DF‑1细胞中的复制，对鸡只体内的ALV‑J能够起到一定的预防治疗效果。因此，本发明为J亚群禽白血病病毒的净化提供了一种有效的辅助手段，为AL的防控以及抗病毒研究提供了新途径。 | ||
| 搜索关键词： | 基于 alv jgp85 基因 保守 区域 序列 sirna 重组 干扰 载体 及其 制备 方法 | ||
【主权项】：
一种基于ALV‑J gp85基因保守区域为靶序列的siRNA重组干扰载体的制备方法，其特征在于：利用gp85基因设计合成siRNA，构建形成siRNA的发卡结构，进一步获得退火双链DNA后，将其克隆入腺病毒载体pHBAd‑U6‑RFP构建重组腺病毒载体pAd‑gp85‑shRNA2，测序鉴定构建成功后，在HEK 293细胞中与骨架质粒进行同源重组获得重组腺病毒。
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