[发明专利]无碳源阻遏毕赤酵母表达系统、其建立方法及应用有效
申请号: | 201710352843.1 | 申请日: | 2017-05-18 |
公开(公告)号: | CN108949869B | 公开(公告)日: | 2022-12-02 |
发明(设计)人: | 蔡孟浩;刘启;周祥山;张元兴 | 申请(专利权)人: | 华东理工大学 |
主分类号: | C12P21/02 | 分类号: | C12P21/02;C12N1/19;C12N15/62;C12R1/84;C12R1/78;C12R1/72;C12R1/645 |
代理公司: | 上海专利商标事务所有限公司 31100 | 代理人: | 陈静 |
地址: | 200237 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明涉及一种高表达量的、无碳源阻遏的、增强型甲醇营养型酵母表达系统,其建立方法及应用。本发明揭示了一种消除甲醇诱导型启动子单一甲醇碳源依赖性和碳源严重阻遏的方法,通过人工改造甲醇营养型酵母细胞内的转录调控遗传线路,提高启动子转录强度并改变其调控模式。本发明的酵母表达系统以及表达方法,使得原本依赖甲醇诱导、存在碳源阻遏的启动子不再依赖甲醇,在其它碳源条件下也可高效地表达外源多肽,最高表达量可达野生型AOX1启动子甲醇条件下的5倍。 | ||
搜索关键词: | 碳源 阻遏 酵母 表达 系统 建立 方法 应用 | ||
【主权项】:
1.一种无碳源阻遏性表达外源多肽的方法,包括:(1)提供甲醇营养型酵母,所述甲醇营养型酵母含有:表达盒1,其表达外源的DNA结合蛋白和转录激活因子的融合多肽,以及表达盒2,从5’→3’依次包括操作性连接的:蛋白结合序列、甲醇诱导型启动子,外源多肽编码基因;(2)在无甲醇条件或非单一甲醇碳源条件下、培养(1)的甲醇营养型酵母,表达外源多肽。
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