[发明专利]重组表达载体及其构建方法和应用有效
| 申请号： | 201710371937.3 | 申请日： | 2017-05-24 |
| 公开（公告）号： | CN107354172B | 公开（公告）日： | 2020-11-06 |
| 发明（设计）人： | 马美湖;张茂杰;耿放;李述刚;黄群;靳国峰 | 申请（专利权）人： | 华中农业大学 |
| 主分类号： | C12N15/866 | 分类号： | C12N15/866;C12N15/66;C12N5/10;A61K38/17;A61P29/00 |
| 代理公司： | 武汉开元知识产权代理有限公司 42104 | 代理人： | 樊戎;冯超 |
| 地址： | 430070 湖*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种优化的动物蛋白基因OCX‑36及其原核表达载体的构建方法和应用，采取的技术方案是对OCX‑36基因稀有密码子进行改造优化，并切除了信号肽，将优化的OCX‑36基因与载体连接，构建重组质粒pMD‑19T‑OCX‑36，转入到大肠杆菌C41(DE3)感受态细胞中，筛选阳性克隆进行培养、蛋白表达，菌体细胞超声破碎、离心、收集上清液经一次镍柱亲和层析即可获得蛋白rOCX‑36。本发明通过对OCX‑36基因序列的优化，实现了蛋白rOCX‑36的可溶性表达，解决了其难于原核表达的技术问题，表达蛋白对患有结肠炎的小鼠具有明显改善病情的效果，显示rOCX‑36可用于制备治疗结肠炎的药物。 | ||
| 搜索关键词： | 重组 表达 载体 及其 构建 方法 应用 | ||
【主权项】：
一种重组表达载体pFastBac1‑OCX‑36，其特征在于：所述重组表达载体pFastBac1‑OCX‑36是由OCX‑36基因序列插入表达载体pFastBac1内；所述OCX‑36基因序列如SEQ ID NO.1所示。
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