[发明专利]双膜法离体培养杨树和双色蜡蘑外生菌根真菌共生体系的方法

摘要

双膜法离体培养杨树和双色蜡蘑外生菌根真菌共生体系的方法，属于生物技术领域。其包括以下步骤1）杨树插枝培养；2）双色蜡蘑培养；3）共生培养。通过本发明建立的系统能够方便观察研究，如可以方便组织切片﹑用激光共聚焦等观察哈氏网（Hartig net）﹑容易无污染提取两者的小分子交换物质，以及有利于无污染地从生物组织提取RNA﹑DNA及蛋白质，该共生系统的建立对深入研究其共生的分子机制具有重要应用价值。

主权项

双膜法离体培养杨树和双色蜡蘑外生菌根真菌共生体系的方法，其特征在于包括以下步骤：1）杨树插枝培养：杨树插枝在含有吲哚丁酸的MS培养基中培养5‑7天，再转移到不含任何激素的MS培养基中培养直至杨树插枝底部形成2‑3cm的根；2）双色蜡蘑培养：将外生菌根真菌双色蜡蘑接种至覆盖在P5培养基上的赛璐玢薄膜上培养直至长出菌丝；3）共生培养：将步骤1）得到的杨树插枝转移至覆盖在P20培养基上的赛璐玢薄膜上，再取步骤2）得到的带有双色蜡蘑的赛璐玢薄膜面朝下或朝上放在根上，用透气的胶带密封培养皿，用不透光材料遮盖根系部分，然后在24℃,16h光照，8h无光照的条件下培养1‑3星期，即可得到共生体系。