[发明专利]通过合成生物学手段异源生物合成灵芝酸的方法有效
申请号: | 201710391001.7 | 申请日: | 2017-05-27 |
公开(公告)号: | CN108929884B | 公开(公告)日: | 2021-07-16 |
发明(设计)人: | 肖晗;王文方;钟建江 | 申请(专利权)人: | 上海交通大学 |
主分类号: | C12N15/81 | 分类号: | C12N15/81;C12P33/00;C12N15/53;C12R1/865 |
代理公司: | 上海交达专利事务所 31201 | 代理人: | 王毓理;王锡麟 |
地址: | 200240 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 一种采用合成生物学手段异源生物合成灵芝酸的方法,通过挖掘和灵芝三萜生物合成相关的细胞色素P450酶(CYP)基因,并在酿酒酵母细胞异源表达该基因来进行筛选鉴定,并对酵母工程菌株的发酵产物进行分离纯化、质谱和核磁共振等分析,确定其为3‑hydroxy‑lanosta‑8,24‑dien‑26‑oic‑acid(灵芝酸Z)。本发明包含从灵芝三萜生物合成催化元件的挖掘,发酵表型初筛与元件功能鉴定,到最终获得异源生物合成的灵芝三萜类物质等一系列的设计及验证,也为异源生产其它灵芝三萜类活性物质提供了范例。 | ||
搜索关键词: | 通过 合成 生物学 手段 生物 灵芝 方法 | ||
【主权项】:
1.一种通过合成生物学手段异源生物合成灵芝酸的方法,其特征在于,首先依据筛选原则从灵芝基因组中选择可能参与灵芝酸生物合成的CYP基因,然后分别将其克隆到酵母表达质粒,并将酵母表达质粒分别转化至重组微生物酿酒酵母中进行异源表达,通过对转化后的菌株进行发酵筛选,最终得到用于催化羊毛甾醇生成灵芝三萜的CYP基因CYP5150L8,即GL24883,从而实现灵芝三萜的异源生物合成。
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