[发明专利]蜜蜂肽聚糖识别蛋白的制备方法在审
申请号: | 201710391140.X | 申请日: | 2017-05-27 |
公开(公告)号: | CN107236035A | 公开(公告)日: | 2017-10-10 |
发明(设计)人: | 刘彦杰;黄家兴;安建东;张红;何峰;赵晓蒙 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院蜜蜂研究所 |
主分类号: | C07K14/705 | 分类号: | C07K14/705;C12N15/70;C07K1/18 |
代理公司: | 北京超凡志成知识产权代理事务所(普通合伙)11371 | 代理人: | 梁香美 |
地址: | 100000*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明涉及分子生物学领域,具体而言,涉及一种蜜蜂肽聚糖识别蛋白的制备方法,包括1)、将蜜蜂PGRP‑SA的基因片段连接表达载体并转化至大肠杆菌进行表达,收集表达得到的包涵体蛋白;2)、将所述包涵体蛋白洗涤后加入蛋白变性剂溶解,随后用复性液进行复性处理;3)、将蛋白浓缩后依次经分子筛柱和阴离子交换柱洗脱纯化。本发明对蜜蜂PGRP‑SA蛋白表达条件进行了优化,优选了各过程中重要试剂的配方,结合采用层析法复性,方法简单快速,操作过程温和,对蛋白损伤小,获得了高纯度的活性蛋白质。 | ||
搜索关键词: | 蜜蜂 肽聚糖 识别 蛋白 制备 方法 | ||
【主权项】:
一种蜜蜂肽聚糖识别蛋白的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:1)、将蜜蜂PGRP‑SA的基因片段连接表达载体并转化至大肠杆菌进行表达,收集表达得到的包涵体蛋白;2)、将所述包涵体蛋白洗涤后加入蛋白变性剂溶解,随后用复性液进行复性处理;3)、将蛋白浓缩后依次经分子筛柱和阴离子交换柱洗脱纯化。
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