[发明专利]肿瘤免疫T细胞检测试剂盒和检测方法

摘要

肿瘤免疫T细胞检测试剂盒和检测方法。试剂盒包括基于SYBR‑Green定量PCR扩增对人体外周血液T细胞中免疫相关靶基因进行PCR扩增以检测其特异定量表达的特异引物，所述免疫相关靶基因包括受体和配体相关靶基因、NK细胞相关靶基因以及关键细胞因子基因。本发明能成功在人体外周血液T细胞中精准定量检测免疫系统相关靶基因的表达谱，可以为肿瘤患者精准免疫治疗提供靶点；在治疗过程中，能及时检测患者对免疫治疗反应的细胞风暴，为避免不良反应提供指导；对治疗过程中和治疗后的免疫系统状态进行评估，为治疗使用抗体药物的量或回输改造T细胞数目、甚至靶点的调整提供支持。本发明检测全面、快速、定量精准、灵敏度高、成本低。

主权项

一种肿瘤免疫T细胞检测试剂盒，包括基于SYBR‑Green定量PCR扩增对人体外周血液T细胞中免疫相关靶基因进行PCR扩增以检测其特异定量表达的特异引物，所述免疫相关靶基因包括受体和配体相关靶基因、NK细胞相关靶基因以及关键细胞因子基因，所述受体和配体相关靶基因包括：2B4、B7‑1、B7‑2、BTLA、C4A、CD4、CD8a、CD11b、CD11c、CD27、CD28、CD3D、CD3E、CD3G、CD40、CD40L、CD48、CD70、CD74、CD80、CD86、CD96、CD137、CD155、CD160、CD226、CD247、CEACAM1、CTLA4、FoxP3、Galectin3、Galectin9、GITR、GITRL、GP100、HHLA2、HVEM、KLRG‑1、LAG3、LIGHT、MAGEA3、HLA‑A、HLA‑B、HLA‑DRA、HLA‑DRB1、MLANA、OX40、OX40L、PD1、PDL1、PDL2、TRA、TRB、TCF7、TIGIT、TIM1、TIM3、TRAV40、VISTA，与每个所述受体和配体相关靶基因所对应的特异引物的DNA序列如表1所示；所述NK细胞相关靶基因包括：CD16、CD94、FAS、FASL、HLA‑E、IL‑2、IL‑12、IL‑15、KIR、MIC‑A、NKG2A、NKG2D、TRAIL、TRAILR、ULBP1，与每个所述NK细胞相关靶基因所对应的特异引物的DNA序列如表2所示；所述关键细胞因子基因包括：Granzyme B、IFN‑gamma、IL‑4、IL‑5、IL6、IL10、IL13、Perforin、TGF‑beta、TNF‑alpha，与每个所述关键细胞因子基因所对应的特异引物的DNA序列如表3所示。