[发明专利]一种液质联用定量检测小儿消食片中槟榔碱含量的方法

摘要

本发明公开了一种液质联用定量检测小儿消食片中槟榔碱含量的方法。所述液相色谱中，流动相由甲醇和10mmol/l乙酸铵溶液组成，采用梯度洗脱。所述质谱采用电喷雾正离子源，多反应监测分析模式(MRM)；该方法中槟榔碱在50～2000ng/ml范围内线性关系良好。供试品溶液前处理方法较HPLC法操作简单，操作时间短，检测方法专属性强、灵敏度高、分析时间短，可用于槟榔碱的含量测定、小儿消食片质量控制。

主权项

1.一种液质联用定量检测小儿消食片中槟榔碱含量的方法，其特征在于，包括步骤(1)样品制备，(2)标准曲线制备，(3)采用液相色谱‑质谱联用检测槟榔碱含量；所述(1)样品制备的步骤包括：取本品若干片，研细后取约0.6g，精密称定，置25ml量瓶中，加0.9％氯化钠注射液定容至刻度，置磁力搅拌器上以850r/min转速，搅拌5min；即得浓度为24mg/ml供试品混悬液；精密移取供试品混悬液3ml，置EP管中，超声30min后，0.22μm MICRO PES聚醚砜水系膜过滤，精密量取续滤液500μl、甲醇490μl及内标储备液10μl，置EP管中，混匀，作为供试品进样溶液；所述内标贮备液中内标为地西泮；所述(2)标准曲线制备的步骤包括：分别精密量取氢溴酸槟榔碱对照品贮备液5，20，50，100，200μl，并分别加入内标贮备液10μl，补足稀释剂适量至终体积为1000μl，制成一系列标准曲线溶液，采用(3)液相色谱‑质谱联用检测的方法检测，记录每个浓度的氢溴酸槟榔碱对应的峰面积；以氢溴酸槟榔碱和内标的峰面积比值为纵坐标，以氢溴酸槟榔碱的浓度为横坐标X，制备氢溴酸槟榔碱的线性回归方程；所述(3)采用液相色谱‑质谱联用检测的步骤包括：(a)液相色谱条件色谱柱：C18柱；流动相：A：10mmol/l乙酸铵溶液，用甲酸调pH至5.2；B：甲醇；洗脱方式：梯度洗脱；洗脱梯度程序如下：0～0.5min，以体积比15％B；2.1～3.0min，以体积比90％B；3.1～6min，以体积比15％B；(b)质谱条件质谱采用Agilent 6430三重四极杆质谱仪，电喷雾正离子源，多反应监测分析模式(MRM)；所述(a)液相色谱条件中，色谱柱为Agilent Poroshell 120SB‑C18色谱柱，4.6mm×75mm，2.7μm，样品检测时间：6min；流速：1.0ml/min；进样量：5μl；柱温：40℃；所述(b)质谱条件中，干燥气：N2；干燥气流速：10L/min，干燥气压力：45psi，干燥气温度：350℃，毛细管电压：4000V；定量离子对槟榔碱：[M+H]+m/z 156.1/44.2，碎片电压：100V，碰撞能量：13eV；内标地西泮：[M+H]+m/z 285.1/193.1，碎片电压：150V，碰撞能量：30eV。