[发明专利]一种B细胞筛选方法及其在单克隆抗体制备中的应用有效
申请号: | 201710417596.9 | 申请日: | 2017-06-05 |
公开(公告)号: | CN107058235B | 公开(公告)日: | 2020-08-11 |
发明(设计)人: | 易俊波;周兆平;买制刚;刘立忠;邹永东 | 申请(专利权)人: | 深圳大学 |
主分类号: | C12N5/10 | 分类号: | C12N5/10;C12N15/62;C12N15/867;C07K16/00 |
代理公司: | 深圳市顺天达专利商标代理有限公司 44217 | 代理人: | 郭伟刚 |
地址: | 518000 广东省*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本申请涉及一种B细胞筛选方法及其在单克隆抗体制备中的应用。该B细胞筛选方法包括如下步骤:S11、在Protein A蛋白基因的N端加上分泌表达的信号肽序列,在C端加上跨膜蛋白基因序列,得到融合外源基因;S12、将所述融合外源基因转染已经免疫完成的B细胞,作为待筛选细胞;S13、向所述待筛选细胞中加入标记荧光的抗原,使用流式细胞仪将带有荧光的细胞分选收集,得到阳性B细胞。本发明将抗体分子集合在细胞表面,利用流式细胞仪的快速精密的分选功能,提前对待融合细胞进行筛选,大大改进传统方法的成功率,准确率,更是解决后期对单克隆抗体细胞株的检测问题。 | ||
搜索关键词: | 一种 细胞 筛选 方法 及其 单克隆抗体 制备 中的 应用 | ||
【主权项】:
一种B细胞筛选方法,其特征在于,包括如下步骤:S11、在Protein A蛋白基因的N端加上分泌表达的信号肽序列,在C端加上跨膜蛋白基因序列,得到融合外源基因;S12、将所述融合外源基因转染已经免疫完成的B细胞,作为待筛选细胞;S13、向所述待筛选细胞中加入标记荧光的抗原,使用流式细胞仪将带有荧光的细胞分选收集,得到阳性B细胞。
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