[发明专利]一种用于原位杂交或免疫组化检测的阳性参照物及其制备方法

摘要

本发明属于生物病理检测领域，具体涉及一种用于原位杂交或免疫组化检测的阳性参照物及其制备方法，所述阳性参照物中组织碎片形态完整，且大小适合观察，节省抗体试剂，避免了由于阳性组织蜡块切片太大，搅碎引起组织形态不完整、不便于实验观察的缺陷；且通过HE染色选取代表性病变组织块，组织阳性表达区域集中，染色阳性定位准确，质控作用好，能够保证实验结果的准确性及科学性，检测结果有充分的可比性；同时，制作方法非常简单、方便，一次操作就能够制备出大量的、能够供多次检测使用的阳性参照物，大大节省了人力和成本，适用于临床批量工作，提高了检测效率。

主权项

一种用于原位杂交或免疫组化检测的阳性参照物，由以下方法制备得到：步骤1：将已知原位杂交或免疫组化染色阳性的肿瘤组织用福尔马林缓冲液固定，切成1.0‑2.0cm×1.0‑2.0cm、厚度为0.3‑0.4cm的组织块，脱水、浸蜡,石蜡包埋制得阳性组织蜡块，HE染色定位，选择阳性组织蜡块上代表性病变组织区域；步骤2：将石蜡和蜂蜡按质量比50:1的比例混合熔化成蜡液，将所得蜡液注入包埋模具中，冷却，制得空白蜡块，用内径为0.8‑2.0mm的组织芯片穿刺针在空白蜡块中穿刺打孔；步骤3：用内径为0.8‑2.0mm的组织芯片穿刺针在步骤1所得的代表性病变组织蜡块穿刺取样后置入步骤2所得的空白蜡块穿刺孔中，加热使加入的病变组织与蜡块融合，冷却，烫熔表面,加上塑料组织包埋框和石蜡液，冷冻，脱模制得组织芯片蜡块；步骤4：将步骤3所得的组织芯片蜡块切成厚度为4‑10um的薄片，二甲苯溶解石蜡，离心，弃上清液，100％乙醇洗涤，离心，弃上清液，95％乙醇洗涤，离心，弃上清液，加入95‑100％乙醇稀释至每毫升溶液中含500‑1000个组织片段，制得阳性参照物。