[发明专利]一种核酸杂交化学发光检测方法

摘要

本发明涉及一种核酸检测方法，特别涉及一种核酸杂交化学发光检测方法，属于生物技术领域。本发明方法通过基质、捕获核酸序列、目标核酸、标记生物素的信号核酸序列、标记链霉亲和素的微球和生物素‑碱性磷酸酶、发光底物等对目标核酸进行特异性检测。本发明通过捕获核酸序列将目标核酸杂交捕获，再经过信号核酸序列、微球、生物素‑亲和素以及碱性磷酸酶的活性即可实现信号放大，从而检测到目标核酸的信号。相对于PCR技术需要扩增，本发明在不增加检测物浓度的前提下实现目标核酸的检测，且具有稳定性好，成本低，检测速度快，对环境要求低等优点。

主权项

一种核酸杂交化学发光检测方法，其特征在于该方法包括如下步骤：（1）根据目标核酸的序列设计捕获核酸序列和信号核酸序列，其中捕获核酸序列5’端进行氨基修饰，信号核酸序列5’标记生物素；（2）将捕获核酸序列固定到基质上；（3）通过核酸杂交反应，捕获核酸序列和待测目标核酸结合；（4）通过核酸杂交反应，标记了生物素的信号核酸序列和结合在捕获核酸序列上的待测目标核酸结合；（5）通过生物素‑亲和素的特异性结合反应，把标记了链霉亲和素的微球结合到信号核酸序列上；（6）通过生物素‑亲和素的特异性结合反应，生物素‑碱性磷酸酶和微球上的链霉亲和素结合；（7）通过上述反应固定到基质上的生物素‑碱性磷酸酶和发光底物反应，通过化学发光分析仪读取结果，根据检测值和空白对照值的差异来判断待测的样本中是否含有目标核酸。