[发明专利]一种制备海兔毒素Dolastatin10的方法

摘要

本发明属化学合成技术领域，涉及下式所示的具有抗癌活性海兔毒素Dolastatin 10的制备方法。本发明所述制备海兔毒素Dolastatin 10的技术路线中，所用的试剂均为常用试剂，该方法具有操作简单、产率高、成本低，便于扩大生产等优点。实验证实，采用本方法的技术路线制备海兔毒素Dolastatin 10的成本显著降低，在实验室中可方便实现1‑10克级的制备，适合大规模制备。

主权项

1.一种制备高抗癌活性肽海兔毒素Dolastatin 10的方法，其特征在于，按下述合成路线，所述的化合物海兔毒素Dolastatin 10的合成包括从中间体2‑1转化，其合成方法包括步骤：步骤1：化合物2、(S)‑叔丁基亚磺酰胺和吡啶对甲基苯磺酸盐(PPTS)在无水硫酸镁、无水硫酸铜或无水硫酸钠的二氯甲烷中反应24‑72小时，经过滤、浓缩及纯化得化合物3；步骤2：‑78摄氏度下，在2‑溴噻唑的甲苯溶液中加入碱，选自正丁基锂、氢化钠、六甲基二硅基胺基锂、六甲基二硅基胺基钠、六甲基二硅基胺基钾或叔丁醇钾，反应0.5‑2小时后，加入化合物3，继续反应3‑12小时，经萃取、浓缩及纯化得化合物4；步骤3：化合物5、化合物6、叔丁醇和制备的二碘化钐溶液在无水四氢呋喃中反应3‑12小时，经萃取、浓缩及纯化得化合物7；步骤4：化合物7与叔丁基二甲基氯硅烷(TBSCl)或叔丁基二甲硅基三氟甲磺酸酯(TBSOTf)在三乙胺、咪唑或2,6‑二甲基吡啶的干燥二氯甲烷中反应1‑18小时，经萃取、浓缩及纯化得化合物8；步骤5：化合物8在二氯二氰基苯醌(DDQ)或氢气/钯碳/氢氧化钯的二氯甲烷/水溶液或甲醇、乙醇溶液中反应0.5‑8小时，经萃取或过滤、浓缩得粗品，然后在二乙胺、三乙胺、叔丁醇钾或氢氧化钠的条件下加入甲基磺酰氯(MsCl)，反应15到60分钟，经萃取、浓缩及纯化得化合物9；步骤6：化合物9在四丁基氟化铵(TBAF)或氢氟酸(HF)的四氢呋喃中反应3‑12小时，经萃取、浓缩得粗品，然后将其与六甲基磷酰三胺(HMPA)溶于干燥四氢呋喃中，‑78摄氏度下滴入六甲基二硅基胺基锂、六甲基二硅基胺基钠、六甲基二硅基胺基钾、叔丁醇钾、丁基锂、氢化钠、二异丙基氨基锂或二异丙基氨基钠，搅拌0.5小时后在冰盐浴下滴入碘甲烷或三氟甲磺酸甲基酯(MeOTf)，继续反应15到60分钟，经萃取、浓缩及纯化得化合物10；步骤7：化合物10在盐酸或三氟乙酸的二氯甲烷中反应1‑3小时浓缩得到粗品胺，将粗品溶于二氯甲烷，加入二碳酸二叔丁酯(Boc2O)、4‑二甲氨基吡啶(DMAP)和三乙胺反应12‑48小时，经浓缩及纯化得化合物11；步骤8：化合物11在甲醇或乙醇中，钯碳/氢气条件下反应3‑10小时，经过滤、浓缩得化合物12；步骤9：化合物12与PCC、DMP、DMSO/(COCl)2在二氯甲烷中反应0.5‑10小时后，经萃取、浓缩得粗品，不经纯化直接溶于叔丁醇/2‑甲基‑2‑丁烯(1:1)的溶液中，加入亚氯酸钠和磷酸二氢钠的水溶液，反应8‑12小时，经萃取、浓缩及纯化得化合物13；步骤10：化合物4在盐酸、三氟乙酸或草酰氯的二氯甲烷或甲醇中反应1‑3小时浓缩得到粗品胺；化合物13和粗品胺在缩合剂DCC、DIC、EDCI、HATU、HBTU、HOBt、HCTU、HAPyU、HBPyU、TBTU、TSTU、TNTU、BOP、PyBOP、PyAOP、DPP‑Cl、DECP、DPPA、MPTA或BOP‑Cl和碱三乙胺、二乙胺、吡啶、4‑二甲氨基吡啶(DMAP)、吗啉、N‑甲基吗啉或N，N‑二异丙基乙胺(DIPEA)的二氯甲烷中反应6‑24小时，经萃取、浓缩及纯化得化合物14；步骤11：化合物15在氢化钠、六甲基二硅基胺基锂、六甲基二硅基胺基钠、六甲基二硅基胺基钾、叔丁醇钾或丁基锂和碘甲烷的干燥四氢呋喃中反应20‑36小时，经萃取、浓缩得粗品；将粗品溶于二甲基亚砜中，加入氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠、碳酸钾、碳酸氢钠或碳酸氢钾和苄溴反应8‑24小时，经萃取、浓缩及纯化得化合物16；步骤12：化合物16在盐酸或三氟乙酸的二氯甲烷中反应1‑3小时浓缩得到粗品胺；N‑叔丁氧基羰基‑L‑缬氨酸和粗品胺在缩合剂DCC、DIC、EDCI、HATU、HBTU、HOBt、HCTU、HAPyU、HBPyU、TBTU、TSTU、TNTU、BOP、PyBOP、PyAOP、DPP‑Cl、DECP、DPPA、MPTA或BOP‑Cl和碱三乙胺、二乙胺、吡啶、4‑二甲氨基吡啶(DMAP)、吗啉、N‑甲基吗啉或N，N‑二异丙基乙胺(DIPEA)的二氯甲烷中反应6‑24小时，经萃取、浓缩及纯化得化合物17；步骤13：化合物17在甲醇或乙醇中，钯碳/氢气条件下反应3‑10小时，经过滤、浓缩得粗品酸；粗品酸和五氟苯酚、N,N'‑羰基二咪唑、氯甲酸乙酯或氯甲酸甲酯在四氢呋喃中反应3‑6小时，备用；‑78摄氏度下在乙酸苄酯的四氢呋喃中滴入六甲基二硅基胺基锂、六甲基二硅基胺基钠、六甲基二硅基胺基钾、叔丁醇钾、丁基锂、氢化钠、二异丙基氨基锂或二异丙基氨基钠，搅拌反应0.5小时后，滴入制备好的备用溶液，继续搅拌反应3小时，经萃取、浓缩及纯化得化合物18；步骤14：化合物18在硼氢化钠、硼氢化锂、硼氢化钾、三乙基硼氢化钠或三乙基硼氢化锂的甲醇或乙醇溶液中反应1‑6小时，经萃取、浓缩及纯化得化合物19；步骤15：化合物19与六甲基磷酰三胺(HMPA)溶于干燥四氢呋喃中，‑78摄氏度下滴入六甲基二硅基胺基锂、六甲基二硅基胺基钠、六甲基二硅基胺基钾、叔丁醇钾、丁基锂、氢化钠、二异丙基氨基锂或二异丙基氨基钠，搅拌0.5小时后滴入碘甲烷或三氟甲磺酸甲基酯(MeOTf)，‑15‑0摄氏度继续反应15到60分钟，经萃取、浓缩及纯化得化合物20；步骤16：化合物20在盐酸或三氟乙酸的二氯甲烷中反应1‑3小时浓缩得到粗品胺；N‑叔丁氧基羰基‑L‑缬氨酸和粗品胺在缩合剂DCC、DIC、EDCI、HATU、HBTU、HOBt、HCTU、HAPyU、HBPyU、TBTU、TSTU、TNTU、BOP、PyBOP、PyAOP、DPP‑Cl、DECP、DPPA、MPTA或BOP‑Cl和碱三乙胺、二乙胺、吡啶、4‑二甲氨基吡啶(DMAP)、吗啉、N‑甲基吗啉或N，N‑二异丙基乙胺(DIPEA)的二氯甲烷中反应6‑24小时，经萃取、浓缩及纯化得化合物21；步骤17：化合物21在盐酸或三氟乙酸的二氯甲烷中反应1‑3小时浓缩得到粗品胺；将粗品胺溶于乙腈中，加入40％的甲醛溶液和还原剂氰基硼氰化钠、氰基硼氰化钾、硼氢化钠、硼氢化钾、三乙基硼氢化钠或硼烷，反应12‑24小时，经萃取、浓缩及纯化得化合物22；步骤18：化合物14在盐酸或三氟乙酸的二氯甲烷中反应1‑3小时浓缩得到粗品胺；化合物22在甲醇或乙醇中，钯碳/氢气条件下反应2‑6小时，经过滤、浓缩得粗品酸。粗品胺和粗品酸在缩合剂DCC、DIC、EDCI、HATU、HBTU、HOBt、HCTU、HAPyU、HBPyU、TBTU、TSTU、TNTU、BOP、PyBOP、PyAOP、DPP‑Cl、DECP、DPPA、MPTA或BOP‑Cl和碱三乙胺、二乙胺、吡啶、4‑二甲氨基吡啶(DMAP)、吗啉、N‑甲基吗啉或N，N‑二异丙基乙胺(DIPEA)的二氯甲烷中反应6‑24小时，经萃取、浓缩及纯化得化合物1。