[发明专利]一种高效杀线虫的组合菌剂的制备方法

摘要

一种高效杀线虫的组合菌剂的制备方法，包括制备金龟子绿僵菌悬液；制备光合细菌嗜酸柏拉红菌PSB‑1悬液；制备克鲁丝假丝酵母菌TY9悬液；制备菌种混合液；准备浒苔以及固体发酵步骤。所得长效生物杀线虫组合剂中，金龟子绿僵菌种含量为菌种含量为3×106cfu·g‑1以上、光合细菌嗜酸柏拉红菌菌种含量为2×107cfu·g‑1以上、克鲁丝假丝酵母菌菌种含量为1×107cfu·g‑1以上。本发明使用了不同类型的三种菌种并以浒苔作为发酵原料进行发酵，发酵产物具备良好的杀线虫效果，且能够提供含有丰富氮磷钾和微量元素的肥料，防治率达85‑100％，作物增产5‑15％。

主权项

一种高效杀线虫的组合菌剂的制备方法，其特征在于，包括：步骤(1)，制备金龟子绿僵菌悬液；将金龟子绿僵菌菌种于24℃接种在PDA斜面培养基上培养5‑10天，该PDA斜面培养基的配方包括，以重量份数计，土豆粉5‑10份、蔗糖1‑5份、玉米粉5‑20份、MgSO4·7H2O 0.1‑5份、以及K2HPO4 0.2‑3份，培养结束后使用去离子水洗涤，洗下液体即金龟子绿僵菌悬液；制备光合细菌嗜酸柏拉红菌PSB‑1悬液；将光合细菌嗜酸柏拉红菌PSB‑1菌种置于液体培养基中培养发酵，在1000‑4000LX灯光照射培养5‑7天，或者在自然光下光照培养15‑30天；其中，该液体培养基包括，以重量份数计，蔗糖5‑10份、乙酸钾0.1‑2份、MgSO4·7H2O 0.01‑0.2份、KH2PO4 0.02‑0.2份、CaCl2·2H2O 0.01‑0.3份、以及CaCO3 0.02‑0.3份，该液体培养基的pH为6.4‑6.8；液体培养所得溶液即光合细菌嗜酸柏拉红菌PSB‑1悬液；制备克鲁丝假丝酵母菌TY9悬液；将克鲁丝假丝酵母菌TY9接种至液体培养基中培养5‑10天，培养温度是25‑33℃，该液体培养基包括，以重量份数计，蔗糖10‑20份、蛋白胨5‑10份、以及氯化钠1‑3份，液体培养所得溶液即克鲁丝假丝酵母菌TY9悬液；步骤(2)，将步骤(1)获得的金龟子绿僵菌悬液、光合细菌嗜酸柏拉红菌PSB‑1悬液、克鲁丝假丝酵母菌TY9悬液按照质量比1∶2∶2.5的比例混合，在混合液中加入占混合夜总重量的5‑8％的蔗糖和1‑10％土豆粉，获得混合菌液，在1‑5℃下保存备用；步骤(3)，将浒苔粉碎，直径在1‑10cm，自然晾晒后备用，得到干燥浒苔；步骤(4)，将步骤(2)的混合菌液、步骤(3)的干燥浒苔混合，同时加入干燥浒苔重量0.1‑0.6％的蔗糖、0.01‑0.5％的尿素以及0.001‑0.01％的Na2B4O7·10H2O，进行自然发酵，发酵10‑20天，自然凉干即得所述的一种长效生物杀线虫组合剂。