[发明专利]一种酶固定化方法及其应用

摘要

本发明提供一种酶固定化方法及其应用。该固定化方法利用磁感应蛋白与靶蛋白的直接融合，然后通过融合蛋白对纳米铁珠的吸附，从而实现酶的固定化。该方法可提高固定化酶的热稳定性和更强的pH耐受性，所制备的固定化酶在重复利用15次后，其相对活性仍然高达80％，在重复利用20次后，其相对活性仍然高达75％。本发明提供了一种操作简单的、效率提高的以及成本降低的酶固定化方法及其应用。

主权项

一种利用磁感应蛋白作为纯化标签实现外源蛋白一步纯化与固定化的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：1)以pET‑28a(+)为载体质粒，向其中插入磁感应蛋白基因，构建一通用载体；2)将外源蛋白基因可操作地插入所述步骤1)中的通用载体中，构建含有外源蛋白基因的重组表达质粒，再将该重组表达质粒导入宿主细胞，获得重组菌株；以及3)培养所述重组菌株，诱导所述外源蛋白基因表达，收集表达产物，向所述表达产物中投入纳米铁珠，实现所述外源蛋白的一步分离纯化与固定化。