[发明专利]Taqman-MGB探针检测绵羊BMPR-IB基因A746G突变的试剂盒和方法

摘要

本发明属于生物技术领域，特别涉及Taqman‑MGB探针检测绵羊BMPR‑IB基因A746G突变的试剂盒和方法。公开的试剂盒，主要包括3管阳性对照样品、DNA提取液Ⅰ、DNA提取液Ⅱ、2×LightCycler 480 probes master反应缓冲液、引物BMF和BMR、探针BPA和BPG、ddH2O。公开检测的方法，包括基因组DNA快速提取，利用引物对基因组DNA进行实时荧光定量PCR扩增，基因型判读。该试剂盒及检测方法操作简单、检测速度快、准确性高，而且不需要进行PCR产物后续分析即可判型，反应全过程在封闭的管内进行，减少了交叉污染。

主权项

Taqman‑MGB探针检测绵羊BMPR‑IB基因A746G突变的引物、探针，其特征在于核苷酸序列如下：其上游引物BMF的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO：1所示；其下游引物BMR的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO：2所示；其野生探针BPA的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO：3所示；其突变探针BPG的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO：4所示；所述野生探针BPA的5’一端标记有荧光基团1，3'一端标记有MGB淬灭基团；所述突变探针BPG的5’一端标记有荧光基团2，3'一端标记有MGB淬灭基团；其中所述的荧光基团1或荧光基团2为FAM、TET、VIC、HEX 或ROX 中的一种，且荧光基团1与荧光基团2不相同。