[发明专利]一种蛹虫草线粒体基因型的检测方法在审
| 申请号： | 201710451715.2 | 申请日： | 2017-06-15 |
| 公开（公告）号： | CN107227353A | 公开（公告）日： | 2017-10-03 |
| 发明（设计）人： | 张永杰;赵宇翔;张姝 | 申请（专利权）人： | 山西大学 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 山西五维专利事务所(有限公司)14105 | 代理人： | 张福增 |
| 地址： | 030006 山*** | 国省代码： | 山西;14 |
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| 摘要： | 本发明提供一种蛹虫草线粒体基因型的检测方法，步骤包括(1)设计扩增蛹虫草8个线粒体内含子位点的引物，从已知线粒体基因型的蛹虫草菌株中通过PCR扩增分别得到有内含子的I类扩增产物和无内含子的II类扩增产物；(2)将属于同类的扩增产物按相同质量进行混合，分别制成DNA分子量标准I和II；(3)从待检测的蛹虫草菌株中进行与步骤(1)相同的PCR扩增，进行琼脂糖凝胶电泳，通过与DNA分子量标准I和II的比较，获知待检测蛹虫草菌株的线粒体基因型。该方法不需要通过测序即可获知待测蛹虫草菌株的线粒体基因型，可辅助用于蛹虫草的真伪鉴别和工业生产蛹虫草菌株间的快速“亲子鉴定”。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 虫草 线粒体 基因型 检测 方法 | ||
【主权项】：
一种蛹虫草线粒体基因型的检测方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)利用已知线粒体基因型的蛹虫草菌株，设计扩增8个线粒体内含子位点的引物，通过PCR扩增分别得到在这些内含子插入位点有对应内含子的I类扩增产物和在这些内含子位点缺失内含子的II类扩增产物；(2)纯化各扩增产物并测定浓度后，将属于同类的扩增产物按相同质量混合在一起，分别进行琼脂糖凝胶电泳，制作成DNA分子量标准I和DNA分子量标准II；所述制作DNA分子量标准I的电泳条件：0.7％的琼脂糖凝胶，电压90V，时间120min；所述制作DNA分子量标准II的电泳条件：2.0％的琼脂糖凝胶，电压100V，时间60min；(3)取待检测的蛹虫草菌株，利用与步骤(1)相同的引物进行PCR扩增，扩增产物分别按步骤(2)中DNA分子量标准I和DNA分子量标准II的琼脂糖凝胶电泳条件进行电泳，通过与DNA分子量标准I和DNA分子量标准II的比较，获知待检测的蛹虫草菌株的线粒体基因型。
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