[发明专利]还原性糖链的靶板衍生化和MALDI-TOF-MS分析方法有效
申请号: | 201710462608.X | 申请日: | 2017-06-19 |
公开(公告)号: | CN107271593B | 公开(公告)日: | 2019-11-19 |
发明(设计)人: | 王仲孚;王波;张英 | 申请(专利权)人: | 西北大学 |
主分类号: | G01N30/06 | 分类号: | G01N30/06;G01N30/72 |
代理公司: | 61221 西安智萃知识产权代理有限公司 | 代理人: | 李炳辉<国际申请>=<国际公布>=<进入 |
地址: | 710069 陕西省西安市*** | 国省代码: | 陕西;61 |
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摘要: | 本发明属于糖生物技术领域,具体涉及一种还原性糖链的靶板衍生化方法,其包括以下步骤:分别配制还原性糖链溶液、吉拉德试剂T溶液和基质DHB的溶液,分别取基质DHB的溶液、还原性糖链溶液、吉拉德试剂T溶液,依次点在MALDI‑TOF‑MS仪器靶板的同一点上;点样后的靶板在室温下放置,直至样品点完全干燥。本发明还提供了对衍生化后的样品进行MALDI‑TOF‑MS分析的方法。本发明的还原性糖链的靶板衍生化及MALDI‑TOF‑MS分析方法,衍生化效率高,且可以有效防止酸性糖链降解,对中性糖链和酸性糖链均可以在正离子模式下进行检测,不需要切换,通用性强,更加简捷、高效。 | ||
搜索关键词: | 原性 衍生 maldi tof ms 分析 方法 | ||
【主权项】:
1.一种还原性糖链的靶板衍生化方法,其包括以下步骤:/n(1)试剂配制/n配置基质DHB溶液,将还原性糖链样品溶于水中得到还原性糖链溶液,将吉拉德试剂T溶解于甲醇、乙酸和水的混合溶剂中得到酸性的吉拉德试剂T溶液,在靶板点样时,取样量相同的情况下,吉拉德试剂T溶液与还原性糖链溶液的质量浓度比大于3.9:1;/n(2)点样/n分别取基质DHB溶液、还原性糖链溶液、吉拉德试剂T溶液各0.5μL,依次点在MALDI-TOF-MS仪器靶板的同一点上;/n(3)干燥/n点样后的靶板在室温下放置0.5小时,样品点完全干燥;/n还原性糖链溶液的质量浓度为3.42mg/mL;/n用于溶解吉拉德试剂T的甲醇、乙酸和水的混合溶剂,其中,甲醇和水体积比为1:6~1:8时,在混合溶剂中添加10%~30%(v/v)的乙酸,至混合溶剂的pH=3~6。/n
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