[发明专利]一种表达鸡4型腺病毒fiber2基因的重组鸡痘病毒转移载体及其构建方法和应用有效
| 申请号： | 201710470625.8 | 申请日： | 2017-06-20 |
| 公开（公告）号： | CN107475296B | 公开（公告）日： | 2021-04-23 |
| 发明（设计）人： | 林丽苗;周庆丰;李群辉;招丽婵;余国莲;李薇 | 申请（专利权）人： | 温氏食品集团股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/863 | 分类号： | C12N15/863;C12N15/66;C12N15/34;A61K39/235;A61P31/14 |
| 代理公司： | 广州容大知识产权代理事务所(普通合伙) 44326 | 代理人： | 刘新年 |
| 地址： | 527400 广东*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明属于生物技术领域，主要涉及一种表达鸡4型腺病毒(FADV4)fiber2基因的重组鸡痘病毒转移载体及其构建方法和应用。所述载体以pMD19T‑Simple载体为基础，TA克隆位点插入FADV4fiber2基因、lacz基因，以及用于同源重组的鸡痘病毒的基因组复制非必须片段LTYB和RTYB。所述方法包括步骤如下：质粒pMD‑TYB；构建质粒pMD22；构建质粒pMD22‑lacz；构建中间载体pMD22‑TYB‑lacz；扩增FADV4 fiber2基因；构建重组鸡痘病毒转移载体pMD22‑TYB‑lacz‑F4；将转移载体pMD22‑TYB‑lacz‑F4与鸡痘病毒共转染鸡胚成纤维细胞，鉴定选出阳性，继续传代培养；鉴定重组鸡痘病毒的表达效果。本发明构建的重组鸡痘病毒转移载体为研制高效的表达鸡4型腺病毒的重组鸡痘病毒基因工程活载体疫苗奠定基础。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 表达 病毒 fiber2 基因 重组 痘病毒 转移 载体 及其 构建 方法 应用 | ||
【主权项】：
一种表达鸡4型腺病毒fiber2基因的重组鸡痘病毒转移载体，其特征在于，所述载体以pMD19T‑Simple载体为基础，在pMD19T‑Simple载体TA克隆位点插入含有鸡痘病毒的早晚期启动子LP2EP2启动下的FADV4fiber2基因、P11启动子启动下的lacz基因，以及用于同源重组的鸡痘病毒的基因组复制非必须片段LTYB和RTYB。
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