[发明专利]一种肉鸡肠道微生物的定量检测方法在审
申请号: | 201710486964.5 | 申请日: | 2017-06-23 |
公开(公告)号: | CN107151704A | 公开(公告)日: | 2017-09-12 |
发明(设计)人: | 罗茜;蒋守群;林厦菁;李龙 | 申请(专利权)人: | 广东省农业科学院动物科学研究所 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12Q1/06 |
代理公司: | 北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙)11350 | 代理人: | 汤东凤 |
地址: | 510640 广东*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明公开了一种肉鸡肠道微生物的定量检测方法,包括以下步骤采用粪便基因组提取试剂盒,将肉鸡盲肠内容物总DNA提取于1.5mLEP管中,测其核酸浓度,灭菌超纯水稀释到20ng/μL,与原液一起保存于‑20℃冰箱,待用;合成肉鸡肠道微生物PCR引物;构建肉鸡肠道微生物质粒;制作标准品;进行样品检测。本发明具有特异性高,重复性好,灵敏度高等特点;通过利用肠道菌群的特异性保守基因片段插入载体构建质粒的方法,提高了菌种检测的准确性,解决了标准菌株做标准曲线的局限性;通过对肉鸡肠道微生物的绝对定量,可以确定某种菌的绝对拷贝数,对肠道菌群多样性和丰度的分析提供了参考依据。 | ||
搜索关键词: | 一种 肉鸡 肠道 微生物 定量 检测 方法 | ||
【主权项】:
一种肉鸡肠道微生物的定量检测方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤1、DNA提取:采用粪便基因组提取试剂盒,将肉鸡盲肠内容物总DNA提取于1.5mLEP管中,测其核酸浓度,灭菌超纯水稀释到20ng/μL,与原液一起保存于‑20℃冰箱,待用;步骤2、合成肉鸡肠道微生物PCR引物;步骤3、构建肉鸡肠道微生物质粒;步骤4、制作标准品;步骤5、进行样品检测。
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