[发明专利]一种钻喙兰花粉的超低温保存方法

摘要

本发明公开了一种钻喙兰花粉的超低温保存方法，包括采粉和干燥、冻存、解冻。其中花粉干燥时放置在透气袋中进行，隔离了干燥剂对花粉的污染且透气性良好而具有很好的干燥效果；其次，本发明降低了玻璃化溶液PVS2中DMSO的浓度，在原有PVS2的成分基础上增加了丙二醇，丙二醇是具有渗透性且低毒的一类防冻剂。因此，本发明提供的一种钻喙兰花粉的超低温保存方法能长时间有效保证花粉活力，简单易行，可根据需要随时取出解冻用于授粉，在钻喙兰的育种和生产上具有重要的实践和推广意义。

主权项

一种钻喙兰花粉的超低温保存方法，其特征在于，包括如下步骤：S1.采粉和干燥：摘取新鲜花粉块，放入透气袋中密封，并将透气袋置于放有干燥剂的培养皿中，在0～4℃条件下放置1～3h；S2.冻存：将花粉块取出，放入冻存管中，加入预处理液，室温下静置10～45 min；然后将冻存管中的预处理液吸出，加入玻璃化溶液MPVS2，将冻存管投入液氮保存；所述玻璃化溶液MPVS2的成分为：30% (w/v)甘油、15% (w/v)乙二醇、7.5～10% (w/v)丙二醇、5～7.5% (w/v)DMSO，用含有0.4M蔗糖的BK无机盐储备液配制，pH为5.7；S3.解冻：将冻存管取出，解冻后将冻存管中原有的溶液吸出一半，并加入相应体积的冲洗液，静置5～10 min，如此重复2～4次。